膠體金標(biāo)記的驢抗羊IgG實(shí)驗(yàn)方法英文名稱Donkey Anti-Goat IgG/Gold
別 名Immunoglobulin G
規(guī)格:0.5ml
說 明 書 0.5ml(10nm 15nm 35nm)
抗體來源Donkey
克隆類型Polyclonal
交叉反應(yīng) goat
產(chǎn)品應(yīng)用IEM=1:20-200 IGS=1:20-200 GICA=1:20-200
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分 子 量150kDa
性 狀Lyophilized or Liquid
濃 度0.4mg/1ml
免 疫 原Full length plasma protein
亞 型IgG
純化方法affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
產(chǎn)品介紹background:
Immunoglobulin G (IgG), is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between 8-17 mg/mL in adult blood. IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response. The IgG molecule has two separate functions; to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen. The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be 1011 variants.
Important Note:
This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
膠體金標(biāo)記的驢抗羊IgG實(shí)驗(yàn)方法方法類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標(biāo)記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,
操作步驟如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
(2)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
(3)加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
(4)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體。
注意事項(xiàng):
1. 如果本抗體用于Western blot (WB)、免疫熒光(IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等實(shí)驗(yàn),請注意回收使用過的稀釋抗體?;厥盏目贵w通常至少可以重復(fù)使用5-10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,請4℃保存。
2. 回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10,000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
3. 提供的Western一抗稀釋液也可以用于免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等適當(dāng)用途。如果希望獲得zui*的檢測效果,請考慮使用上述檢測的一抗稀釋液。
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