保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
鼠李糖乳桿菌 | 僅供科研 | GOY-01J6641 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
阿魏酸 99%腐霉利Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標(biāo)記核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體IgG
阿魏酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(HPLC)吸油棉 300*500*4mm*60G 配套P1176還原鐵罐Anti-Phospho-NF-κB2 p100 (Ser866/870)/FITC 熒光素標(biāo)記核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體IgG
四氮唑 98%吸油棉200*300*4mm*24G 配套P1211還原鐵罐Anti-p-NFKBp65(Ser536)/FITC 熒光素標(biāo)記化核因子/化k基因結(jié)合核因子抗體IgG
植酸鈣 Ca: 20.0 ~ 24.0 %1,3-二氯烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Phospho-NFKBp65 (Ser276)/FITC 熒光素標(biāo)記化核因子NF-κB p65抗體IgG
苯甲二甲基縮 98%反式-1,3-二氯烯 97%Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933)/FITC 熒光素標(biāo)記化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體IgG
苯甲二甲基縮 ≥98%,Kosher1,3-二氯烯 (cis + trans), ≥92%(GC)Anti-NGAL/FITC(Neutrophil Gelatinase associated Lipocalin) 熒光素標(biāo)記中性粒明膠相關(guān)載脂蛋白抗體IgG
3,4-己二酮 96%,FCC甲磺酸達氟沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-NGB/FITC 熒光素標(biāo)記腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體IgG
烯硫 50%甲磺酸達氟沙星Anti-NGF- Beta/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)生長因子-β抗體IgG
鼠李糖乳桿菌(2S,3aS,7aS)-2-羧八氫 98%猴B病(BV)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體18抗體LC3C 微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體
4,4'-二羧二 98%猴25羥3(25 HVD3)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體65抗體LC3B/MAP LC3β/MAP1A 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體
3,4'-二氨二 97%大鼠ELISA試劑盒生長終止特異性同源盒因抗體LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體
2- 98%大鼠組織因子與活化7復(fù)合物免疫試劑盒谷氨受體2抗體LBP1/Upstream Binding Protein 1 上游結(jié)合蛋白1抗體
1,3-二(4-氨氧) 98%大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒谷氨受體3抗體Layilin 透明質(zhì)受體抗體
2-吡 98%大鼠組織因子(TF)前體 免疫試劑盒谷氨受體4抗體Layilin 透明質(zhì)受體抗體
對氨叔丁酯 98%大鼠組織因子(TF)免疫試劑盒促代謝型谷氨受體1抗體LATS2 腫瘤抑制因LATS2抗體
3,5-二氨三氟 98%大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA) 免疫試劑盒甘氨受體α4抗體LATS1 腫瘤抑制因LATS1抗體
4-叔丁環(huán)己 98%大鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒生長分化因子8抗體LAT/LAT1 T活化連接蛋白抗體
間三氟 99%大鼠組織蛋白去乙?;?HD)免疫試劑盒化糖原合激-3β抗體LASS6 長壽相關(guān)因lASS6抗體
2-乙酰吡 98%大鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒Glu-Glu tag抗體LASS5 長壽相關(guān)因lASS5抗體
2-乙酰-2-噻唑啉 97%大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒胰高血糖素樣肽-2抗體LASS4 長壽相關(guān)因lASS4抗體
魚腥草 98%大鼠組N-轉(zhuǎn)移(HNMT)免疫試劑盒甘氨受體alpha 1/2/3型抗體LASS3 長壽相關(guān)因lASS3抗體
3-巰乙酯 96%大鼠組(HIS)免疫試劑盒抑制型G蛋白α3抗體LASS2 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因1抗體
乙糠硫酯 99%大鼠足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒促性釋放激素受體抗體LASS1 長壽相關(guān)因lASS1抗體