選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱:大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
1,3-二(2,6-二異基苯基)氯化咪唑 250285-32-6301 薯瘟錫 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.25g單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
1,3-二(2,6-二異基苯基)氯化咪唑 250285-32-6307 啶嘧磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):10mg單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
聚己內(nèi)酰胺粉 25038-54-4319 氟蟲脲 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.1gL選擇素(SELL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)20-40目
N-Boc-N'-succinyl-4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediamine 250612-31-832 禾草滅 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.25g白血病抑制因子(LIF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95% (HPLC)
聚(9-乙烯咔唑) 25067-59-8327 伏草隆 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.25g瘦素(LEP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
聚(9-乙烯咔唑) 25067-59-8328 唑呋草 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):10ml瘦素受體(LEPR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
Physalaemin 2507-24-6345 乙磷鋁 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.1g白介素5(IL5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥97% (HPLC)
5-氨基-1-戊 2508-29-4352 赤霉素標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.1g白介素3(IL3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%
乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚 25086-89-9354 glycalpyramide標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50%乙溶液(共聚物Copolymer,7:3)
乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚 25086-89-9358 氯吡氯磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):10mlN-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50%乙溶液(共聚物Copolymer,7:3)
3-乙炔基吡啶 2510-23-8364 氟鈴脲 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):0.1g白介素1受體Ⅰ(IL1R1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
叔十二硫 25103-58-6370 虱螨脲,磷化氫標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào): 0.1g白介素1受體Ⅰ(IL1R1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
叔十二硫 25103-58-6371 惡霉靈20mg白介素1受體Ⅱ(IL1R2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
3,5-二甲基異惡唑-4-羧酸 2510-36-3378 咪唑乙煙酸0.1g標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):白介素1受體Ⅱ(IL1R2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
3,5-二甲基異惡唑-4-羧酸 2510-36-3382 雙胍辛胺 10ml標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):白介素18(IL18)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Geotrichum candidum
兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Geotrichum candidum
小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Filobacillus milosensis
大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptococcus dysgalactiae
兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Niasla yeongjuensis
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa試劑盒尿酶活性比色法定量 OBFC1 (CST complex subunit STN1) 100 ul
細(xì)胞醇脫氫酶總活性比色法定量 OCM(Oncomodulin-1) 20 ul
組織醇脫氫酶總活性比色法定量 NRARP (Notch-regulated ankyrin repeat-containing protein) 100 ul
血液醇脫氫酶總活性比色法定量 OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) 20 ul
細(xì)胞醛脫氫酶總活性比色法定量 OPALIN (Opalin) 300 ul
組織醛脫氫酶總活性比色法定量 NHEJ1 (Non-homologous end-joining factor 1) 100 ul
血液醛脫氫酶總活性比色法定量 NRP2 (Neuropilin-2) 100 ul
細(xì)胞醛脫氫酶1活性比色法定量 OBFC1 (CST complex subunit STN1) 20 ul
組織醛脫氫酶1活性比色法定量 NSMAF (Protein FAN) 1 Kit
血液醛脫氫酶1活性比色法定量 IVL(Involucrin) 100 ul
細(xì)胞醛脫氫酶2活性比色法定量 NCEH1 (Neutral cholesterol ester hydrolase 1) 100 ul
組織醛脫氫酶2活性比色法定量 NINJ1 (Ninjurin-1) 100 ul
血液醛脫氫酶2活性比色法定量 NPTXR(Neuronal pentraxin receptor) 100 ul
細(xì)胞醛脫氫酶3活性比色法定量 NPFF (Pro-FMRFamide-related neuropeptide FF) 20 ul
組織醛脫氫酶3活性比色法定量 MAP2(Microtubule-associated protein 2) 100 ul
血液醛脫氫酶3活性比色法定量 NPSR1 (Neuropeptide S receptor) 100 ul
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。