特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611210-1 |
商品介紹:
測定意義 GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長反應,主要負責直鏈淀粉的合成。 測定原理 GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉移到淀粉引物上,同時生成ADP;進一步通過反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應生成的ADP數量呈正比,通過340nm下測定NADPH的增加量,可以計算GBSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ毛木耳人核糖核酸酶H(RNASEH)elisa定量檢測試劑盒
大鼠β內啡肽受體枯草芽胞桿菌人甲狀旁腺激su相關蛋白(PTHrP)elisa定量檢測試劑盒
小鼠活化蛋白C大腸埃希氏菌定量標準菌株人巨噬激蛋白(MSP)elisa定量檢測試劑盒
小鼠α葡萄糖苷酶枯草芽孢桿菌人催產su受體(OTR)elisa定量檢測試劑盒
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ異常漢遜酵母人甲狀腺激su反應基因(THRSP)elisa定量檢測試劑盒
大鼠鈣/鈣調su依賴性蛋白激酶2肺炎支原體人解旋酶樣轉錄因子(HLTF)elisa定量檢測試劑盒
小鼠胰蛋白mei印度洋細小棒狀菌人叉頭框蛋白C2(FOXC2)elisa定量檢測試劑盒
人轉化生長因子β1芽孢桿菌人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa定量檢測試劑盒
大鼠肝脂酶綠粘帚霉人基質金屬蛋白mei24(MMP-24)elisa定量檢測試劑盒
人轉化生長因子α黏膜乳桿菌白A1 (IgA1)elisa定量檢測試劑盒
大鼠煙型乙酰受體枯草芽孢桿菌人基質金屬蛋白mei9(MMP-9)elisa定量檢測試劑盒
小鼠破骨分化因子瓦克青霉人晶體蛋白(CLC)elisa定量檢測試劑盒
大鼠蕈型乙酰受體米氏假單胞菌人鋅結合α2-糖蛋白1(AZGP1)elisa定量檢測試劑盒
小鼠Toll樣受體9新月彎孢人抗酸性磷酸酶(ACP5)elisa定量檢測試劑盒
人基質衍生因子1β那波鏈霉菌人黑色su瘤標記物(MART/Melan-A)elisa定量檢測試劑盒
結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒微量法骨鈣su(OC/BGP)試劑盒Anti-PPID Antibody甲型副傷寒沙門氏
I型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXI)試劑盒 Anti-PPIB Antibody絲an酸/精an酸相關核基質蛋白1
II型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-II)試劑盒 Anti-PPID Antibody絲an酸/精an酸相關核基質蛋白2
III型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-III)試劑盒 Anti-PPIG Antibody鴨沙門氏
Anti-PPL Antibody轉錄調節(jié)因子DEC2
球蛋白Y(IgY)試劑盒Anti-PPM1A Antibody鞘氨激酶2
球蛋白G(IgG)試劑盒Anti-PPM1D Antibody絲an酸/蘇an酸蛋白激酶3
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后