商品介紹:
測定意義:
LOX廣泛存在于動植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應,導致膜脂過氧化。在生物體的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。
測定原理:
LOX催化亞you酸氧化,氧化產(chǎn)物在280nm處有特征吸收峰;測定280nm吸光度增加速率,來計算LOX活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調式移液槍和蒸餾水。 |
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
脂氧合酶 (LOX)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | BJ-01611183-1 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
熒光suAPC標記猴IgM天藍褐鏈霉菌小鼠硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記豬IgG釀酒酵母小鼠血栓suB4(TXB4)elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記大鼠IgMVibrio小鼠組織多肽抗原(TPA)elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記豬胰島su蛋白假單孢菌小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記血藍蛋白長根奧德菇(長根菇)小鼠高密度脂蛋白 (HDL) elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記枯草芽孢桿菌小鼠基質衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)elisa定量檢測試劑盒
熒光suAPC標記胰糜蛋白mei蕈狀芽孢桿菌小鼠誘導轉化生長因子β(TGFbI)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記鏈霉親和su柯氏黑蛋巢小鼠血管內皮生長因子C(VEGF-C)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記親合su長孢被孢霉小鼠血清樣蛋白A2(SAA2)elisa定量檢測試劑盒
Cy3標記蛋白A石南棒桿菌小鼠血管內皮生長因子D(VEGF-D)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記兔IgG(流式同型對照)冷海水黃桿菌小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記小鼠IgG(流式同型對照)圈卷產(chǎn)色鏈霉菌小鼠α1(Ta1)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記羊IgG(流式同型對照)泡盛曲霉小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽38(PACAP-38)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記大鼠IgG(流式同型對照)大腸埃希氏菌小鼠心肌特異性肌鈣蛋白 (c/TNNT2)elisa定量檢測試劑盒
熒光suCy3標記牛IgG玫瑰菌核鏈霉菌小鼠弓形蟲IgD抗體elisa定量檢測試劑盒
脂氧合酶 (LOX)測試盒微量法肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)試劑盒 Anti-NR1H3 Antibody磷酸化SH2結構域轉化蛋白1
胃泌su抑制肽(GIP)試劑盒 Anti-NR1H4 Antibody磷酸化SH2結構域轉化蛋白1
波形蛋白(VIM)試劑盒Anti-NR1I2 Antibody核糖核蛋白抗原
成纖維生長因子4(FGF4)試劑盒 Anti-NR2F2 Antibody血影蛋白A鏈非紅型/收縮蛋白/Spectrin α
轉化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒Anti-NR2F6 AntibodyP物質
白分化抗原CD30(CD30)試劑盒 Anti-NR3C1 Antibody生長抑su受體1
多巴受體D5(D5R/DRD5)試劑盒Anti-NR3C1 Antibody(PB0325)生長抑su受體2