目前微流控芯片主要采用激光誘導(dǎo)熒光作為檢測(cè)器。此檢測(cè)器具有較強(qiáng)的專一性,檢測(cè)靈敏度高,但是通常需要對(duì)樣品進(jìn)行衍生。紫外檢測(cè)器是通用型檢測(cè)器,也是液相色譜和毛細(xì)管電泳中普遍應(yīng)用的檢測(cè)器。然而,在微流控芯片中大多采用的玻璃和PMMA在紫外區(qū)都有吸收,因此只能采用成本較高的石英基質(zhì)芯片。日本的島津公司研制出采用石英芯片、紫外檢測(cè)的MCE-2010型微芯片電泳系統(tǒng)[1],由于石英芯片上帶4個(gè)電極并與光學(xué)狹縫一體化構(gòu)成,使芯片的制作極為復(fù)雜,成本也增大。Hjertén等[2]與曹小丹等[3]都采用了非石英基質(zhì)芯片與石英毛細(xì)管耦合的方法進(jìn)行微流控芯片的紫外檢測(cè)。在這些方法中,芯片的制作也較為復(fù)雜,整個(gè)系統(tǒng)仍處于研究階段,未有商品化的微流控芯片檢測(cè)儀與之配套。
本文介紹了由中科院大連化物所與北京彩陸科學(xué)儀器有限公司聯(lián)合研制,可商品化的微流控芯片紫外檢測(cè)儀,見(jiàn)圖1。它由一體化的芯片電泳平臺(tái)、高壓電源、紫外檢測(cè)器和相應(yīng)軟件組成。由于使用標(biāo)準(zhǔn)化的PDMS-石英芯片,芯片制作簡(jiǎn)便,也降低了成本,并且避免了石英芯片封接較難的問(wèn)題。
圖 1 微流控芯片紫外檢測(cè)儀
以對(duì)氨基苯甲酸(p-aminobenzoic acid)為試樣,對(duì)儀器的性能進(jìn)行了考察。取濃度為1、5、10、50 ppm的對(duì)氨基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行芯片電泳檢測(cè),在濃度1到50 ppm范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)r=0.9984。此外,在對(duì)該儀器進(jìn)行靈敏度考察時(shí),其靈敏度達(dá)到0.1 mg/L,與常規(guī)毛細(xì)管電泳儀的檢測(cè)限接近。圖2是濃度為1 ppm的對(duì)氨基苯甲酸樣品平行進(jìn)行5次進(jìn)樣后得到的結(jié)果。檢測(cè)波長(zhǎng)選用270 nm,緩沖液為30 mM硼砂[4],進(jìn)樣電壓為400 V,進(jìn)樣時(shí)間為30秒,分離電壓為600 V,分離距離為47 mm。
圖 2 1 ppm 對(duì)氨基苯甲酸的芯片電泳譜圖
圖3是以BECKMAN毛細(xì)管性能測(cè)試混合物A溶液(Capillary Performance Test Mixture A)作為樣品所得到的芯片電泳譜圖。檢測(cè)波長(zhǎng)選用270 nm,緩沖液為pH 6.86的磷酸緩沖液,進(jìn)樣電壓為400 V,進(jìn)樣時(shí)間為30秒,分離電壓為800 V(分離電壓為由負(fù)到正),分離距離為47 mm。
圖 3 BECKMAN毛細(xì)管性能測(cè)試混合物A溶液的芯片電泳譜圖
其中:1. 苯甲酸,2.對(duì)羥基苯甲酸, 3.對(duì)羥基苯乙酸
此微流控芯片紫外檢測(cè)儀有如下的優(yōu)點(diǎn):1)采用紫外檢測(cè)器,增強(qiáng)了儀器的通用性,大大增加了樣品的適用范圍;2)檢測(cè)靈敏度較高,可接近或超過(guò)常規(guī)毛細(xì)管電泳儀的水平;3)芯片成本低,并可重復(fù)使用。此儀器可適用于各科研機(jī)構(gòu)以及衛(wèi)生、環(huán)境監(jiān)測(cè)等部門(mén)的實(shí)驗(yàn)工作。
參考文獻(xiàn):
1. Nakanishi H, Nishimoto T, Arai A, Abe H, Kanai M, Fujiyama Y, Yoshida T, Electrophoresis, 2001,22:230
2. Végvári ?, Hjertén S, Electrophoreis, 2002,23:3479
3.曹小丹, 方 群, 方肇倫,基于復(fù)合型微流控芯片的紫外檢測(cè)電泳分析系統(tǒng)的優(yōu)化及應(yīng)用,第二屆全國(guó)微全分析系統(tǒng)學(xué)術(shù)會(huì)議, 2004,131
4. 王昕,新疆化工,2004,1:37