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細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞間交叉污染并不罕見,多是由于在培養(yǎng)中操作時各種細(xì)胞同時進(jìn)行,混雜使用器皿和液體所致,這種污染能使細(xì)胞的生長特性、形態(tài)特征等發(fā)生變化,有些變化較輕、不易察覺,有些可能由于污染的細(xì)胞具有生長優(yōu)勢最終壓過原來細(xì)胞而導(dǎo)致細(xì)胞的生長抑制,最終死亡。常用觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)、分析生長特性和核型、檢測細(xì)胞的標(biāo)記物等方法檢測交叉污染的細(xì)胞。
操作規(guī)范條例:
1、操作時,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,每開一個試劑要用酒精燈消毒。
2、從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前,用酒精清潔雙手,盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。
3、培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。
4、使用移液槍時,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導(dǎo)致細(xì)菌滋生。
5、先取試劑、耗材,再取移液槍、裝槍頭。很多人習(xí)慣先an裝槍頭,然后去拿試劑、耗材,殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染。
6、凍存細(xì)胞時凍存管蓋子需擰緊,復(fù)蘇細(xì)胞時,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,以確認(rèn)蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,水面不可超過凍存管蓋沿,不建議直接扔進(jìn)水中,以免水滲入造成污染。
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