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1.反向色譜柱實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):
使用緩沖液或含鹽的流動相,實(shí)驗(yàn)完后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
2.長期保存色譜柱:
如,色譜柱要長時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下,對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑或硫柳汞)中,并將堵頭堵上,儲存溫度是室溫。
因?yàn)?,色譜柱是消耗品,隨著使用時(shí)間或進(jìn)樣次數(shù)的增加,會出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,一般來說是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
依次采用20~30倍的色譜柱體積的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,異丙醇作為流動相沖洗色譜柱,完成后再以相反順序沖洗色譜柱。
2.正相柱的再生:
依次以20~30倍的色譜柱體積正己烷、異丙醇(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱,然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意以上溶劑必須嚴(yán)格脫水。
3.離子交換柱的再生:
長時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
特別說明:
再生過程必須隨時(shí)關(guān)注柱壓變化,柱壓過高易導(dǎo)致硅膠變形與開裂及鍵合相極性端連接順序紊亂,同時(shí)要保證再生時(shí)間足夠。再生時(shí)選擇不具備在線脫氣的獨(dú)立泵送系統(tǒng)色譜儀器進(jìn)行,以防正相溶劑損壞脫氣機(jī)密封膜或分子篩及比例閥等儀器精密部件。
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