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影響微生物生長的因素很多，簡要介紹如下：

（1）水分

水分是微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中進(jìn)行生長的必要條件。芽孢、孢子萌發(fā)，首先需要水分。

微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長發(fā)育的水分活性范圍內(nèi)，均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃?/span>活性區(qū)域。

（2）溫度

在一定的溫度范圍內(nèi)，每種微生物都有自已的生長溫度三基點(diǎn)：

生長溫度

生長溫度

生長溫度

在生長溫度三基點(diǎn)內(nèi)，微生物都能生長，但生長速率不一樣。微生物只有處于生長溫度時(shí)，生長速度才，用時(shí)最 短。超過或生長溫度，微生物不會(huì)生長，甚至?xí)劳觥?/span>

一般情況下，每種微生物的生長溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。根據(jù)微生物生長溫度的不同，可將它們分為三個(gè)類型：

a.嗜冷微生物：其生長溫度多數(shù)在-10℃－20℃之間

b.中溫微生物：其生長溫度一般在20℃－45℃之間

c.嗜熱微生物：生長溫度在45℃以上。

（3）營養(yǎng)物濃度

細(xì)菌的生長率與營養(yǎng)物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/(K+C) ，營養(yǎng)物濃度與生長率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。

K值是細(xì)菌生長的很基本的特性常數(shù)。它的數(shù)值很小，表明細(xì)菌所需要的營養(yǎng)濃度非常之低。

然而營養(yǎng)太低時(shí)，細(xì)菌生長就會(huì)遇到困難，甚至還會(huì)死亡。這是因?yàn)槌松L需要能量以外，細(xì)菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能。

（4）氧氣

按照微生物對(duì)氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個(gè)類型。

a. 需氧微生物：這類微生物需要氧氣供呼吸之用，沒有氧氣，便不能生長。但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的，很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類型。

b. 兼性需氧微生物：這類微生物在有氧氣存在或無氧氣存在情況下，都能生長，只不過所進(jìn)行的代謝途徑不同罷了。在無氧氣存在的條件下，它進(jìn)行發(fā)酵作用，例如酵母菌的無氧乙 醇發(fā)酵。

c. 微量需氧微生物：這類菌是需要氧氣的，但只在0.2大氣壓下生長。這可能是由一它們含有在強(qiáng)氧化條件下失活的酶，因而只有在低壓下作用。

d. 耐氧微生物：這類微生物在生長過程中，不需要氧氣，但也不怕氧氣存在，不會(huì)被氧氣所殺死。

e. 厭氧微生物：這類微生物在生長過程中，不需要分子氧。分子氧存在對(duì)它們生長產(chǎn)生毒害，不是被抑 制，就是被殺死。

根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類。

（1）好氧培養(yǎng)：也稱“好氣培養(yǎng)”。這種微生物在培養(yǎng)時(shí)，需要有氧氣加入，否則就不能生長良好。

在實(shí)驗(yàn)室中，斜面培養(yǎng)是通過棉花塞從外界獲得無菌的空氣。

三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過搖床振蕩，使外界的空氣源源不斷地進(jìn)入瓶中。

（2）厭氧培養(yǎng)：也稱“厭氣培養(yǎng)”。這類微生物在培養(yǎng)時(shí)，不需要氧氣參加。在厭氧微生物的培養(yǎng)過程中，最 重要的一點(diǎn)就是要除去培養(yǎng)基中的氧氣。一般可采用下列幾種方法：

a.降低培養(yǎng)基中的氧化還原電位：常將還原劑如、硫基醋酸鹽等，加入到培養(yǎng)基中，便可達(dá)到目的。有的將一些動(dòng)物的死的或活的組織如牛心、羊腦加入到培養(yǎng)基中，也可適合厭氧菌的生長。

b.化合去氧：這也有很多方法，主要有：用焦性沒食子酸吸收氧氣；用磷吸收氧氣；用好氧菌與厭氧混合培養(yǎng)吸收氧氣；用植物組織如發(fā)芽的種子吸收氧氣；用產(chǎn)生氫氣與氧化合的方法除氧。

c.隔絕阻氧：深層液體培養(yǎng)；用石蠟油封存；半固體穿刺培養(yǎng)。

d.替代驅(qū)氧：用二氧氣碳驅(qū)代氧氣；用氮?dú)怛?qū)代氧氣；用真空驅(qū)代氧氣；用氫氣驅(qū)代氧氣；用混和氣體驅(qū)代氧氣。

根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類。

（1）固質(zhì)培養(yǎng)：是將菌種接至疏松而富有營養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中，在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法。

（2）液體培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)中，通過液體培養(yǎng)可以使微生物迅速繁殖，獲得大量的培養(yǎng)物，在一定條件下，還是微生物選擇增菌的有效方法。

較常用的菌種保藏法有斜面或半固體傳代保藏法，以及冷凍真空干燥法和液氮超 低溫保藏法。

1. 斜面或半固體傳代保藏法

此法保藏菌種常用的培養(yǎng)基有普通肉湯瓊脂斜面、血清斜面、血瓊脂斜面、雞蛋斜面和血清肉湯半固體培養(yǎng)基等等。

在斜面或半固體培養(yǎng)基表面，往往加入滅菌液體石蠟，用以隔絕空氣。此外，厭氧菌的傳代保藏則常采用瘡肉基。

2. 冷凍真空干燥法

將加入一定保護(hù)劑（如無菌脫脂牛奶）的菌種懸液冷凍，然后在凍結(jié)狀態(tài)下經(jīng)過真空干燥，使菌種處于半性的休眠狀態(tài)，從而達(dá)到長久保藏的目的。一般可保藏?cái)?shù)年甚至數(shù)十年之久。該法需要特殊的低溫干燥設(shè)備。

3. 液氮超 低溫保藏法

將保藏的菌種分散在保護(hù)劑中（如甘油、二 甲亞楓、蔗糖和吐溫80等），或?qū)⑵桨迳仙L良好的培養(yǎng)物打塊，原封不動(dòng)地置于保護(hù)劑中，預(yù)凍后保藏在液氮超 低溫（-196℃）中。該法是目前較理想的菌種保藏方法，可較長期保藏菌種。