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血清是非常復(fù)雜的混合物,成分多樣,含有各種生理平衡的分子量差別很大的生物分子,有的對細(xì)胞生長有促進(jìn)作用,如含有攜帶激素、礦物質(zhì)、微量元素和脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等。血清能夠提供細(xì)胞貼壁因子和擴(kuò)散因子。血清中含有起穩(wěn)定作用和解毒的因子,能夠維持培養(yǎng)基的pH 值并抑制蛋白酶直接或間接的酶解。但是血清的加入也帶來了很多問題:
1、 血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;
2、 血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;
3、不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。
4、 對大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(成纖維細(xì)胞)同時抑制另一類細(xì)胞生長(表皮細(xì)胞)。
5、 血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。
6、 取材中可能帶入支原體、病毒,對細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響。
7、 血清的使用使得實驗和生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化困難,其中的蛋白質(zhì)使得某些轉(zhuǎn)基因蛋白生物藥品生產(chǎn)中分離純化工作很難完成。
8、大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構(gòu)成生產(chǎn)成本的主要部分之一。
9、 為了使與傳染源相關(guān)的風(fēng)險減少到低,存在多個國家間限制進(jìn)出口生物材料的國際法規(guī)。
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