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微生物分類復雜,類別繁多,形態(tài)特征多樣并且具有很強的突變能力,除此之外,大多數(shù)微生物在目前都是無法人為培養(yǎng)的[1]。因此,亟須利用新的技術(shù)手段去分離、培養(yǎng)、篩選、鑒定與分析微生物群落。液滴微流控技術(shù)是微流控技術(shù)的主要分支,是指對極小體積液流(10-9~10-15 L)進行精確控制的技術(shù),這一技術(shù)的出現(xiàn)為解決很多生物學問題提供了新的方法。
液滴微流控作為一個高通量高分辨率且高度集成化的新興技術(shù)平臺,可與多種檢測技術(shù)結(jié)合,在從微生物培養(yǎng)到微生物組學研究再到微生物資源開發(fā)利用等方面扮演重要的角色。由于其優(yōu)勢,液滴微流體技術(shù)有望成為微生物學家探索微生物世界的基礎技術(shù)工具。目前液滴微流控技術(shù)仍面臨著一些挑戰(zhàn)。首先,液滴微流控技術(shù)用于微生物研究仍有一些技術(shù)局限需要突破,如液滴中物質(zhì)交換能力有限、難以解決不同微生物種類的需氧量差異等問題。此外,還缺乏標準化的設備和操作流程,只有少量的液滴微流控設備用于特定需求的分析,大多數(shù)利用液滴微流控技術(shù)的研究仍需要研究人員自己設計并制作微流控設備,設備的制作和操控均存在很大挑戰(zhàn)。因此,未來需要對液滴微流控系統(tǒng)進行自動化和簡約化改進,為其在微生物研究中的應用提供標準化的設備和操作流程,繼續(xù)創(chuàng)新和改進下游的分析手段。相信隨著微流控技術(shù)的發(fā)展,在多學科的高度配合下,液滴微流控技術(shù)進一步發(fā)展和成熟直至走進每一個微生物實驗室,服務微生物學科的研究發(fā)展將成為現(xiàn)實。
法國Elveflow成立于2012年,產(chǎn)品是圍繞暢銷的OB1流量控制器構(gòu)建,提供全套的微流控儀器及系統(tǒng),至今已經(jīng)科研和工業(yè)用戶提供多達2,000套系統(tǒng)。Elveflow 儀器具有模塊化的,可升級的特點,產(chǎn)品有用于微流體的單通道壓力泵,OB1多通道壓力真空控制器,MUX distribution旋轉(zhuǎn)分配閥,流量開關(guān),閥門及閥門控制器,MFS流量傳感器,MPS壓力傳感器,傳感器讀取器,氣泡探測器,儲液管及微流體的成套應用系統(tǒng)。
微流控細胞培養(yǎng)是采用微流控系統(tǒng)在微流控芯片中進行的動態(tài)細胞培養(yǎng),微流控細胞培養(yǎng)芯片的尺寸適合細胞的尺寸,因此被用于動態(tài)細胞培養(yǎng)中。微流控細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵能夠模擬細胞微環(huán)境,采用微流控進行細胞培養(yǎng)的優(yōu)勢有增加系微環(huán)境的生理相關(guān)性,將尺度縮小到組織的規(guī)模,創(chuàng)建復雜的共培養(yǎng)體系,施加動力和機械力,增加組織界面的模擬水平,減少藥物測試的動物實驗模型,模擬血液、淋巴和間質(zhì)液體的流動等。
法國Elveflow采用微流控系統(tǒng)進行細胞培養(yǎng)的應用案例有:
w 微流控芯片上的細胞相互作用研究
w 采用微流控系統(tǒng)進行研究細菌對壓力和環(huán)境變化的適應性
w 采用微流控循環(huán)閥進行細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的再循環(huán)
w 動態(tài)細胞培中細胞培養(yǎng)的循環(huán)
w 如何在微流控芯片中進行動態(tài)細胞培養(yǎng)的細胞染色
w 微流控動態(tài)細胞培養(yǎng)中細胞培養(yǎng)基灌注
w 微流控動態(tài)細胞培養(yǎng)中自動化細胞接種
w 微流控心肌細胞培養(yǎng)模型
w 采用微流控細胞培養(yǎng)灌注系統(tǒng)進行快速細胞培養(yǎng)基的切換
w 用于微流控qPCR的熒光讀取
w 采用微流控系統(tǒng)進行循環(huán)腫瘤細胞的捕獲
w 微流控芯片上活細胞檢測
w 采用微流控壓力泵進行弱蛋白結(jié)合的定量
微流細胞培養(yǎng)中采用的OB1 多通道壓力泵的參數(shù):
OB1 微流控壓力和流量控制器可以選擇1-4個通道或者更多通道,每個通道的壓力和真空范圍可選,5個可選的范圍為:0-200mbar, 0-2000mbar, 0-8000mbar, -900-1000mbar, -900mbar-6000mbar. 具有模塊化,可升級的特點,采用Elveflow ESI 軟件進行控制。
OB1 微流控壓力和流量控制器的性能參數(shù):
w 壓力穩(wěn)定性0.005% FS
w 相應時間9ms
w 壓力分辨率0.003%FS
w 穩(wěn)定時間低于35ms
OB1 微流控壓力和流量控制器可用于數(shù)字微流控,流動化學&聚合物合成,細胞培養(yǎng)中的細胞灌注,細胞培養(yǎng)液的順序注射,單液滴測序,RNA 測序,芯片實驗室,器官芯片等應用。
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