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細(xì)胞抱團(tuán)是利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的常見問題,細(xì)胞成團(tuán)后將影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與繁殖,那么,如果出現(xiàn)這種情況該如何解決呢?
首先,細(xì)胞成團(tuán)并不一定都會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。如果細(xì)胞輪廓清晰胞體通透,呈串狀均勻聚集,證明細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)良好。但多數(shù)情況下,聚團(tuán)的細(xì)胞都是輪廓模糊、透光性差,甚至?xí)霈F(xiàn)合胞體,伴有細(xì)胞碎片,這證明細(xì)胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變,狀態(tài)不佳。解決細(xì)胞成團(tuán)問題可以通過以下幾種方式:
1、如果細(xì)胞抱團(tuán)不影響生長(zhǎng)就沒問題,只是計(jì)數(shù)時(shí)較麻煩。在消化時(shí),可在細(xì)胞由多角形變成圓型之前,用手輕磕細(xì)胞培養(yǎng)瓶的側(cè)壁,使細(xì)胞從壁上脫落(最好不要吹打,對(duì)細(xì)胞形狀和生長(zhǎng)都不好)。
2、如果感覺有死細(xì)胞的 DNA,在細(xì)胞懸液中加入幾滴無菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)將 DNA 鏈打斷。輕柔地吹打細(xì)胞,防止對(duì)細(xì)胞膜造成物理損傷。
3、如果細(xì)胞抱團(tuán)是肉眼可見的,可讓細(xì)胞靜置半分鐘左右,然后吸取上半部分沒有抱團(tuán)的細(xì)胞懸液來傳代。如果細(xì)胞抱團(tuán)肉眼不可見,目前還沒有特別好的分離方法,只能等細(xì)胞狀態(tài)改善后將這部分細(xì)胞慢慢排除出去。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)抱團(tuán)現(xiàn)象,可以按照以上方法進(jìn)行處理,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要及時(shí)觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),并針對(duì)所出現(xiàn)的情況做出相應(yīng)的調(diào)整。
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