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HPLC的流動相常見的脫氣方法有以下幾種:
1超聲波脫氣,配好的溶液超聲波脫氣10-30分鐘,可除去部分的氣體,脫氣效率在80%左右,注意流動相溫度會上升,溶劑會揮發(fā),混合溶劑的比例會發(fā)生變化。
2真空脫氣,效果比超聲波好,要注意不同溶劑的揮發(fā)對流動相組成的影響。這里可以用真空泵也可以用水泵,純有機(jī)溶劑對真空泵有損壞作用。
3在線脫氣機(jī),使用方便,效果與氦氣差不多,投入比較大。
4在線脫氣裝置,用氦氣,脫氣,耗材成本高。
如何避免氣泡的產(chǎn)生,可以從以下幾個方面來考慮。
1將確定的幾種流動相混合,用合適的方法脫氣,適合單泵體系的分析,這種體系要求比較低,脫氣不*影響也不是很大,有條件在檢測器出口加一個反壓管或反壓柱。
2如果要梯度分析,或者幾個流路的等度分析,對于低壓混合的泵,建議先單獨(dú)各自脫氣,如有可能在檢測器出口接一個反壓柱,基本可避免氣泡的產(chǎn)生。當(dāng)然,如果有在線脫氣機(jī),則容易的多,不事先脫氣,大部分時間是沒問題的,事先脫氣效果更好。如果是高壓混合泵,產(chǎn)生氣泡的幾率比較低,在檢測器出口接一個反壓柱,一般不脫氣也沒問題;如果流動相再脫氣,極少再出現(xiàn)氣泡。
3還可以這樣考慮,例如純乙腈與純水混合時容易產(chǎn)生氣泡,尤其做梯度的時候。不用純乙腈與純水二相,建議用90%的乙腈及10%乙腈-水相預(yù)混合后脫氣,然后再上泵。
4在線脫氣裝置,流動相脫氣后,為了防止空氣重新溶解于流動相,在分析時,不斷在流動相中通氦氣,理論上效果是好的,只是成本比較高。
5脫好的溶液,放置時間長了,又會溶解新的氣體,需重新處理。
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