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液相色譜儀是我們實(shí)驗(yàn)用儀器,但是很多人對于儀器檢定的規(guī)程并不清楚,不知道如何操作,對于我們實(shí)驗(yàn)室人員來說這是不行的,那么液相色譜儀檢定規(guī)程有哪些?下面就帶大家一起來了解一下。
液相色譜儀檢定規(guī)程如下:
1.過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2.對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.打開HPLC工作站(包括計算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。
4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動菜單。
5.有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖洗時速度不要超過10?ml/min。
6.調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。
7.設(shè)計走樣方法。點(diǎn)擊file,選取select?users?and?methods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點(diǎn)擊new?method。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。
9.填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
10.流動相均需色譜純度,水用20m的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
11.柱子是非常脆弱的,次做的方法,先不要讓液體過柱子。
12.所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾。
13.壓力不能太大,不要超過2000 psi。
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