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口服給藥簡(jiǎn)單，方便，患者依從性高，是藥物遞送 的選途徑。但目前超過(guò) 40%市售藥物、60%研發(fā) 中藥物都存在難溶性問(wèn)題。得益于載體輔料的開(kāi)發(fā)應(yīng) 用，改善疏水性藥物的溶解性和生物利用度已有多種方法，如: 使用磷脂復(fù)合物、生物相容性聚合物、固體分 散體、脂質(zhì)體或膠束等。但目前滿足上述方法要 求、符合中藥成分特性的輔料尤為缺乏。本課題組前 期發(fā)現(xiàn)一些糖基化苷類化合物在水性環(huán)境中，能夠形 成與表面活性劑相似的結(jié)構(gòu)，可作為固體分散體的載 體，實(shí)現(xiàn)難溶性藥物的高效增溶。羅漢果甜苷是羅 漢果的甜味成分。植物含量較高且水溶性好，目前已 經(jīng)有純度 98%以上成品用作食品添加劑，其甜度為蔗 糖的 300 倍。羅漢果苷 V 是羅漢果甜苷的主要成分， 是一種天然小分子化合物，由親水性葡萄糖基和疏水 性三萜類兩部分組成，與已報(bào)道的糖苷類增溶載體結(jié) 構(gòu)相似，故選其為載體，以研究其對(duì)難溶性藥物的增溶 效果。羅漢果苷 V 甜度高，熱穩(wěn)定性好，色澤淺，易于使用，不受 pH 值( pH 值在 2～10) 的影響。它在中國(guó)、 美國(guó)、日本等一些國(guó)家作為非營(yíng)養(yǎng)性天然甜味劑而聞 名。同時(shí)，含葡基輔料還可能通過(guò)與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體 1( glucose transporter 1，GLUT1) 結(jié)合實(shí)現(xiàn)跨越血-腦屏 障，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)藥物的腦靶向轉(zhuǎn)運(yùn)。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

LC-2010CHT 液相色譜儀( 含高壓泵、柱溫 箱、自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外檢測(cè)器、LC solution 色譜工作站， 日本島津公司) ; KQ-250DE 型數(shù)控*( 昆山市超聲儀器有限公司) ; BT125D 電子天平( 北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司，感量: 0．01 mg) ; XW-80A 旋渦混合器( 海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司) ; 旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置( 含 N-1100 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、OSB-2100 型油 浴鍋，上海愛(ài)朗儀器有限公司) ; SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用 真空泵( 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司) ; DKZ 系列電熱恒 溫振蕩水槽( 上海一恒科技有限公司) ; 2XZ-2 型旋片 式真空泵( 臨海市永昊真空設(shè)備有限公司) ; 差示掃描 量熱儀 NETZSCH DSC 204( NETZSCH GEＲAETEBAU GmbH) 等。

1．2 試藥

*對(duì)照品( 阿拉丁，含量: 99%，批號(hào): E1822047) ; 羅漢果苷 V( 成都普瑞法科技開(kāi)發(fā)有限公 司，含量: 98%，批號(hào): PＲF8093001) ; 去離子水; 乙腈為 色譜純; 其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 *-羅漢果苷 V 物理混合物的制備

取*適量，按 1∶5，1∶10，1∶15，1∶20( W/W) 添加相應(yīng) 量的羅漢果苷 V，置于研缽中研細(xì)，混勻，置干燥器中 備用。

2．2 *-羅漢果苷 V 固體分散體的制備

采用溶 劑法制備*-羅漢果苷 V 固體分散體，按 1∶20 ( W/W) 稱取適量*和羅漢果苷 V，加入適量的 80%乙醇，常溫下 50 Hz 超聲 30 min，置于 50 ℃ 水浴 鍋中進(jìn)行減壓濃縮干燥 60 min，即可得到固體分散體。 得到固體狀固體分散體，用研缽研磨均勻，置干燥器中 備用。

2．3 高效液相色譜( HPLC) 測(cè)定*

2．3．1 色譜條件

色譜柱: Inertsil  ODS-3( 4．6 mm × 250 mm，5 μm) ; 柱溫: 30 ℃ ; 檢測(cè)波長(zhǎng): 227 nm; 流速: 1 mL·min-1 ; 流動(dòng)相: 乙腈-水( 65∶35) 。

2．3．2 *對(duì)照品溶液的配制

精密稱定* 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超聲 使其溶解，用乙腈定容，配制得濃度約為 1 mg·mL－1 *對(duì)照品溶液。

2．3．3 羅漢果苷 V 對(duì)照品溶液的配制

精密稱定羅 漢果苷 V 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超聲使其溶解，用乙腈定容，配制得濃度約為 1 mg·mL－1 羅漢果苷 V 對(duì)照品溶液。

2．3．4 *-羅漢果苷 V 固體分散體溶液的配制

精密稱定*-羅漢果苷 V 固體分散體 10 mg，置于 10 mL 棕色量瓶中，加入乙腈 5 mL，超聲使其溶解，用 乙腈定容，配制得濃度約為 1 mg·mL－1 *-羅漢果 苷 V 固體分散體溶液。

2．3．5 專屬性實(shí)驗(yàn)

分別取空白溶劑、羅漢果苷 V 對(duì) 照品溶液、*對(duì)照品溶液和*-羅漢果苷 V 固 體分散體溶液，按“2．3．1”條件，進(jìn)行 HPLC 分析，紫杉 醇典型色譜圖見(jiàn)圖 1。結(jié)果表明，在本色譜條件下，紫 杉醇峰形良好，保留時(shí)間約為 6．8 min，空白溶劑和羅 漢果苷 V 對(duì)主峰的測(cè)定無(wú)干擾。

2．3．6 檢測(cè)限及定量限

取“2．3．2”項(xiàng)制備的* 對(duì)照品溶液，按一定比例稀釋，得到一系列濃度溶液， 進(jìn)行 HPLC 分析，*檢測(cè)限( S /N= 3) 和定量限 ( S /N= 10) 分別為 20 ng·mL－1 和 50 ng·mL－1 ( n = 5) 。 2．3．7 線性關(guān)系考察 取“2．3．2”項(xiàng)制備的*對(duì) 照品溶液，按一定比例稀釋，得到濃度分別為 0． 05， 0．1，0．2，1，5，10，25，50 μg·mL－1 的標(biāo)準(zhǔn)液，按“2．3．1” 項(xiàng)條件進(jìn)行 HPLC 分析，以*峰面積( A) 為縱坐 標(biāo)，*濃度( C，μg·mL－1 ) 為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回 歸，結(jié)果表明*在 0．05 ～ 50 μg·mL－1 內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為: A = 44 827 C+387．46，Ｒ2 = 1．000 0。

2．3．8 精密度實(shí)驗(yàn)

精密量取“2．3．2”項(xiàng)制備* 對(duì)照品溶液 0．5 mL，置于 100 mL 量瓶中，加流動(dòng)相定 容，得到 5 μg·mL－1 *溶液。按“2．3．1”項(xiàng)方法重 復(fù)測(cè)定 6 次，結(jié)果峰面積穩(wěn)定，ＲSD 為 0．8%，表明儀器 精密度良好。

2．3．9 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取*-羅漢果苷 V 固體分散 體( 1∶20) 約 20 mg，共 6 份，精密稱定。置于10 mL量 瓶中，加適量乙腈溶解并定容。精密量取 0．5 mL，置 10 mL 量瓶，加流動(dòng)相定容。配制得相當(dāng)于*含 量 5 μg·mL－1 溶液。按“2．3．1”項(xiàng)方法測(cè)定，計(jì)算 6 份 樣品中的*含量。測(cè)定 6 份固體分散體中* 的含量分別為 4．3%，4．2%，4．3%，4．4%，4．4%，4．3%， ＲSD 為 1．3%，表明該方法重復(fù)性良好。

2．3．10 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取“2．3．9”項(xiàng)下含* 5 μg· mL－1 的*-羅漢果苷 V 固體分散體溶液，室溫下放 置 0，2，4，6 h，按“2．3．1”項(xiàng)方法分別測(cè)定，*峰面 積 ＲSD 為0．06%，表明*溶液在室溫下 6 h 內(nèi)穩(wěn) 定。

2．3．11 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

參考文獻(xiàn)方法，分別 精密稱取*適量，按處方比例( 1∶20) 添加羅漢 果苷 V，分 別 制 成 高、中、低 濃 度 溶 液 各 3 份，按 “2．3．1”項(xiàng)方法測(cè)定。分析結(jié)果見(jiàn)表 1，加樣回收率在 97．9% ～101．5%，方法準(zhǔn)確度良好。

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