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島津Lc-10AD液相色譜儀操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程

目的：建立Lc-10AD型液相色譜儀操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程，嚴(yán)格按規(guī)程操作，及時(shí)對(duì)液相色譜儀進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。

范圍：適用于Lc-10AD型液相色譜儀的操作及維護(hù)保養(yǎng)。

職責(zé)：QC檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)實(shí)施本規(guī)程，QC負(fù)責(zé)人監(jiān)督執(zhí)行。

內(nèi)容：

1.原理

液相色譜是用高壓*將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑，緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品，由流動(dòng)相帶入柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后，依次進(jìn)入檢測(cè)器，色譜信號(hào)由積分儀記錄，得到的電信號(hào)-時(shí)間曲線。

2.系統(tǒng)適用性

按各品種項(xiàng)下要求對(duì)儀器進(jìn)行適用性試驗(yàn)，包括以下要求：

色譜柱的理論塔板數(shù)（N）：理論板數(shù)應(yīng)高于各品種項(xiàng)下規(guī)定的小理論板數(shù)，若理論板數(shù)低于各品種項(xiàng)下規(guī)定的小理論板數(shù)，應(yīng)改變色譜柱的某些條件（如柱長(zhǎng)、載體性能、色譜柱充填的優(yōu)劣等）使理論板數(shù)達(dá)到要求。

分離度和拖尾因子：除另有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.5，T應(yīng)在0.95～1.05之間。

3.儀器組成

本系統(tǒng)由Lc-10ADvp溶劑輸送泵、手動(dòng)進(jìn)樣閥7725i、SPD-10Avp紫外檢測(cè)器、浙大智達(dá)N2000色譜工作站和電腦等組成。

4.準(zhǔn)備
4.1根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱（箭頭一側(cè)朝上）。

4.2檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常

4.3流動(dòng)相用到緩沖鹽時(shí)，先用10%甲醇水沖洗柱子60min，然后在換上緩沖鹽。

4.4準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾，用吸氣減壓裝置脫氣。

4.5按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程配制樣品和對(duì)照溶液，用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾。

5.開(kāi)機(jī)

接通電源，依次開(kāi)啟泵，檢測(cè)器（在進(jìn)樣前30min打開(kāi)）、浙大智達(dá)N2000色譜工作站。

5.1 Lc-10AD泵操作

5.1.1逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排液閥45°，打開(kāi)排液閥；

5.1.2按泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以8ml/min(可設(shè)定)的流速?zèng)_洗，3min（可設(shè)定）后自動(dòng)停止；

5.1.3將排液閥順時(shí)針旋轉(zhuǎn)到底關(guān)閉排液閥。如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。如氣泡仍排不掉則用注射器抽流動(dòng)相.

5.2參數(shù)設(shè)定

5.2.1 波長(zhǎng)設(shè)定：在檢測(cè)器顯示初始屏幕時(shí)，用數(shù)字鍵輸入所需波長(zhǎng)值，按[Enter]鍵確認(rèn)，按[CE]鍵退出到初始屏幕，[back]鍵返回，[FUNC]鍵更換設(shè)定項(xiàng)目。

5.2.2 流速設(shè)定：在輸送泵顯示初始屏幕時(shí)，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需的流速（柱在線時(shí)流速一般不超過(guò)1ml/min），按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。

FLOW/PRESS      PRESSURE     P.MAX     P.MIN

       0.000            0            0          0

逐次按[func]鍵“FLOW/PRESS”項(xiàng)下“0.000”閃動(dòng)時(shí)，輸入流量后按Enter。P.MAX，P.MIN閃動(dòng)，輸入較高220和低0保護(hù)壓力后，按ENTER。

5.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動(dòng)應(yīng)不超過(guò)1MPa。如超過(guò)則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按5.1.3操作。

5.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時(shí)，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。

5.3 浙大智達(dá)N2000色譜工作站設(shè)定

5.3.1打開(kāi)電腦主機(jī)電源和屏幕顯示器。

5.3.2按《N2000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開(kāi)“在線色譜工作站”軟件，輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項(xiàng)方法參數(shù)后，

 5.3.3選中需使用的通道，點(diǎn)擊OK，進(jìn)入色譜工作站按下“數(shù)據(jù)收集”頁(yè)的[方法控制] 按鈕，選擇相對(duì)應(yīng)的采集方法及保存路徑。

5.3.4 方法控制

5.3.4.1進(jìn)入色譜工作站界面后點(diǎn)擊左上角方法.選擇檢測(cè)方法及數(shù)據(jù)保路徑.注意更改文件前綴名（即樣品的前綴名.一般為被檢測(cè)樣品首字母. ）

5.3.5.數(shù)據(jù)采集

5.3.5.1點(diǎn)擊查看基線，按檢測(cè)器ZERO鍵后，再點(diǎn)擊零點(diǎn)校正，待基線走穩(wěn)后，將進(jìn)樣閥手柄置“LOAD”處，進(jìn)樣，進(jìn)樣后將進(jìn)樣閥手柄轉(zhuǎn)到“INJECT”位置，點(diǎn)擊采集數(shù)據(jù)，工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)。

5.3.5 數(shù)據(jù)保存及處理數(shù)據(jù)

當(dāng)樣品中所有組分峰都出現(xiàn)后，按“停止采集”按鈕，結(jié)束色譜信號(hào)文件的采集。進(jìn)入離線工作找到相應(yīng)的數(shù)據(jù)采集的保存路徑查看圖譜并處理數(shù)據(jù).

6.關(guān)機(jī)

先點(diǎn)擊停止查看基線然后用鼠標(biāo)單擊右上角關(guān)閉對(duì)話框關(guān)閉系統(tǒng)，選擇關(guān)閉計(jì)算機(jī)，單擊是。關(guān)閉檢測(cè)器用純甲醇充分清洗泵和色譜柱，色譜柱的沖柱時(shí)間一般為1-1.5小時(shí)左右.

7.維護(hù)保養(yǎng)

7.1紫外檢測(cè)器應(yīng)在進(jìn)樣前30min打開(kāi)，樣品分析完畢立即關(guān)閉。

7.2 檢測(cè)時(shí)方法用到高度梯度洗脫時(shí)，要先單次運(yùn)行一次。待基線平穩(wěn)后方可進(jìn)樣，流動(dòng)相用到緩沖鹽時(shí)，要先用10%的甲醇水沖洗1h，才可換上緩沖鹽。

7.3樣品分析完畢，系統(tǒng)需用0.45µm濾膜過(guò)濾的純甲醇沖洗1-1.5h，并用注射器吸取純甲醇沖洗進(jìn)樣器，流動(dòng)相中含有鹽，要用10%甲醇水過(guò)渡沖洗1h，再用純甲醇沖洗系統(tǒng)。

7.4若發(fā)現(xiàn)空載系統(tǒng)壓力升高，可先下列步驟進(jìn)行排除：

7.4.1將保護(hù)柱拆下，觀察柱壓是否正常，如果保護(hù)柱過(guò)濾芯片堵塞則予以更換。

7.4.2如更換保護(hù)柱過(guò)濾芯后仍不正常，再將色譜柱拆下，觀察不連接色譜柱時(shí)壓力。如仍然壓力很高，說(shuō)明柱子沒(méi)有問(wèn)題。

7.4.3 然后依次從色譜柱往進(jìn)流動(dòng)相的方向查找問(wèn)題，拆掉單向閥上面的螺絲，觀察壓力變化，如果仍然有壓力，則說(shuō)明單向閥可能有問(wèn)題。將單向閥拆下，觀察壓力變化，如壓力正常，則將單向閥用甲醇超聲清洗30min，然后安裝再觀察壓力變化。

7.4.4 如問(wèn)題仍然存在，可以考慮用5%稀硝酸水和純異丙醇清洗系統(tǒng)或者更換單向閥，中間一定要用超純水過(guò)渡，再用純甲醇清洗，接上色譜柱用甲醇再次清洗系統(tǒng)。注：（5%稀硝酸水溶液超聲時(shí)不要超過(guò)5min，因硝酸有腐蝕金屬作用）

7.5 檢測(cè)完樣品間隔3小時(shí)之內(nèi)可不用關(guān)閉檢測(cè)器，若超過(guò)3小時(shí)可先關(guān)閉檢測(cè)器，以減少氘燈能量的損耗。

7.6液相色譜儀四周應(yīng)干燥清潔，切忌流動(dòng)相或化學(xué)試劑濺到儀器上，產(chǎn)生腐蝕。

7.7每年校正一次，若產(chǎn)生異常情況或換氘燈，則必須再校正。

8.每次使用必須按要求填好儀器使用記錄及維護(hù)保養(yǎng)記錄。