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白介素elisa試劑盒具體請(qǐng)參照以下步驟

來源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司   2018年06月27日 16:37  

白介素elisa試劑盒具體請(qǐng)參照以下步驟:       
1.洗滌液:使用前配制好,有的試劑盒說明書會(huì)標(biāo)明,配制好的洗滌液,在4度的條件下一般可以存放一個(gè)月;如果試劑盒說明書沒有標(biāo)明,盡量用新鮮的洗滌液,不需要多配制;
2.顯色液:顯色液一般分A液和B液,使用前15分鐘配制好;  
3.標(biāo)準(zhǔn)品:大部分ELISA試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)配制好的;還是4度保存,有的是需要現(xiàn)配制的,按照試劑盒說明書進(jìn)行操作;  
4.濃縮生物素結(jié)合的二抗和HRP:如果需要配制,試劑盒說明書沒注明配好可以保存多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用,還是一樣,使用前15分鐘配制;原則上是試劑盒說明書上沒有指出配制物的儲(chǔ)藏方式的話,應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用;這個(gè)千萬不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,以免蓋子上粘連以后總量不夠用;
5.加 樣:室溫溫育的試劑,特別是溫育時(shí)間比較短的實(shí)驗(yàn)操作的試劑,加樣對(duì)數(shù)據(jù)的影響比較大,特別要注意加樣問題。  
測定步驟:
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
 2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
 3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不一致,對(duì)競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。 
白介素elisa試劑盒磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 ,英文名: PLC ELISA Kit

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磷脂酶D2(PLD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PLD2 ELISA Kit

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