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elisa檢測試劑盒使用時的注意事項

來源:上海邦景實業(yè)有限公司   2018年04月08日 12:59  

elisa檢測試劑盒使用時的注意事項
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體或抗原的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法"在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
 2.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
elisa檢測試劑盒大鼠硫酸肝素(HS)ELISA試劑盒    ,英文名:    HS ELISA Kit    
大鼠磷脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)ELISA試劑盒    ,英文名:    PLTP ELISA Kit    
大鼠磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA試劑盒    ,英文名:    PLCβ1 ELISA Kit    
大鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA試劑盒    ,英文名:    GPC3 ELISA Kit    
大鼠磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA試劑盒    ,英文名:    PLAA ELISA Kit    
大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒    ,英文名:    PCK1 ELISA Kit    
大鼠磷酸酶張力蛋白同源物(PTEN)ELISA試劑盒    ,英文名:    PTEN ELISA Kit    
大鼠磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA試劑盒    ,英文名:    PI3K2α ELISA Kit    
大鼠磷酸二酯酶3A(PDE3A)ELISA試劑盒    ,英文名:    PDE3A ELISA Kit    
大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn)ELISA試劑盒    ,英文名:    Lptn ELISA Kit    
大鼠淋巴細胞功能關聯(lián)抗原2(LFA2)ELISA試劑盒    ,英文名:    LFA2 ELISA Kit    
大鼠淋巴細胞功能關聯(lián)抗原1α(LFA1α)ELISA試劑盒    ,英文名:    LFA1α ELISA Kit    
大鼠淋巴毒素β(LTβ)ELISA試劑盒    ,英文名:    LTβ ELISA Kit    
大鼠亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒    ,英文名:    LRG1 ELISA Kit    
大鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTNNβ1 ELISA Kit    
大鼠粒細胞趨化蛋白2(GCP2)ELISA試劑盒    ,英文名:    GCP2 ELISA Kit    
大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA試劑盒    ,英文名:    GMCSF ELISA Kit    
大鼠粒細胞集落刺激因子(GCSF)ELISA試劑盒    ,英文名:    GCSF ELISA Kit    
大鼠利鈉肽受體3(NPR3)ELISA試劑盒    ,英文名:    NPR3 ELISA Kit    
大鼠利鈉肽受體2(NPR2)ELISA試劑盒    ,英文名:    NPR2 ELISA Kitelisa檢測試劑盒    

 

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