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ELISA試劑盒檢測(cè)法是免疫確診中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地運(yùn)用于多種病原微生物所致使的盛行癥、寄生蟲(chóng)病及非盛行癥等方面的免疫確診。也已運(yùn)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，依據(jù)現(xiàn)已運(yùn)用的效果，以為ELISA法具有活絡(luò)、特異、簡(jiǎn)略、敏捷、安穩(wěn)及易于自動(dòng)化操作等特征。不只適用于臨床標(biāo)本的查看，并且由于一天以?xún)?nèi)能夠查看幾百甚至上千份標(biāo)本,因而，也適合于血清盛行病學(xué)查詢(xún)。本法不只能夠用來(lái)測(cè)定抗體，并且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種前期確診的超卓方法。因而ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的運(yùn)用規(guī)劃日益擴(kuò)展。
ELISA試劑盒檢測(cè)可概括四個(gè)方面：
A.?定量查看體液中抗原或抗體成份。
B.?研討抗酶抗體的構(gòu)成。
C.?閃現(xiàn)微量的免疫沉淀反響。
D.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
ELISA試劑盒檢測(cè)中，進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的挑選是很首要的，其間包括:
1）酶符號(hào)抗體作業(yè)濃度的挑選：首先用直接ELISA法進(jìn)行開(kāi)始效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶符號(hào)抗體部份）。然后再固定其它條件或采用“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號(hào)抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗(yàn)系統(tǒng)里地滴定其作業(yè)濃度。
2）包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時(shí)，央求純度要好,吸附時(shí)一般央求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相一同，查詢(xún)陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。挑選OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。關(guān)于大都蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)一般為1～10μg/ml。
3）固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方法能夠是凹孔平板、試管、珠粒等?，F(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體，在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選：用等量抗原包被，在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反響，查詢(xún)其顯色反響是不是均一性，據(jù)此判明其吸附功用是不是超卓。