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ELISA 是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA 的影響因素較多，加強(qiáng)質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。

ELISA 原理

●根據(jù)檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價(jià)以上抗原,不能測小分子半抗原）。
●間接法檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
●競爭法檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。

分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)是人操作的，因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識(shí)：
◎檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA 原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。
◎某些特殊項(xiàng)目的檢測如抗HIV 等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。
分析前質(zhì)控
◎ELISA 原理：1971 年Engvall 等人把免疫組化的EIA 技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA 技術(shù)。
特點(diǎn)：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號(hào)放大；
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程；
靈敏度特異性相對較高。
局限性：只能檢測到ng 水平
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；
線性范圍窄（一個(gè)數(shù)量級(jí)）；
存在"HD-HOOK" 效應(yīng)。
 
ELISA 今后的發(fā)展方向

●聚苯乙烯表面的制備。已有的技術(shù)是酰肼化；*化；預(yù)包被多聚賴氨酸等，均是產(chǎn)品。
●酶促信號(hào)放大的改變，如酶促熒光、酶促化學(xué)發(fā)光等。

ELISA 臨床意義

●各型肝炎的特征及標(biāo)志物
乙肝二對半的模式及臨床意義
HBsAg HBeAg HBcAb-IgG HBcAg-IgM HBeAb HBsAb &n bsp; 臨床意義
---- 急性HBV 感染早期HBV 復(fù)制活躍
-- 急慢性HBV 感染，HBV 復(fù)制活躍
- -- 急慢性HBV 感染，HBV 復(fù)制中躍
- - 急慢性HBV 感染，HBV 復(fù)制低躍
- - -HBV 復(fù)制停止或極低
-- -- 平靜的HBV 攜帶狀態(tài)，HbsAg
-- ---HBV 既往感染，未產(chǎn)生抗-HBs
-- -抗HBs 出現(xiàn)前期，HBV 復(fù)制低
-- - HBV 感染恢復(fù)期
-- -- HBV 感染恢復(fù)期
- 不同亞型ＨＢＶ再感染
-----ＨＢＶ－ＤＮＡ整合
-----＋ 病后或接種疫苗后獲得免疫