液相色譜色譜柱是色譜系統(tǒng)的核心。在堿性分析物分析方面,制藥業(yè)一直是HPLC色譜柱向高速、高分辨率、更好的峰形發(fā)展的主要驅(qū)動力。此外,QC實驗室已經(jīng)被要求改進色譜柱的批次重現(xiàn)性。從70年代到90年代,在填充材料的標(biāo)準(zhǔn)顆粒尺度(10-3μm)的逐級縮小方面已經(jīng)有穩(wěn)定的改進。80年代后期,高純度B型硅材料(低金屬含量)的引入是一個巨大進步,減少了硅醇的活性,并在批次間的一致性方面有重大改進?,F(xiàn)在高純硅的使用是所有現(xiàn)代硅膠基質(zhì)色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。
液相色譜仍然是一個高度有活力的領(lǐng)域,在儀器、色譜柱技術(shù)、應(yīng)用等方面有很多創(chuàng)新。醫(yī)藥科學(xué)家們zui初將這些新技術(shù)應(yīng)用于研究、開發(fā)和質(zhì)量控制,他們是這項技術(shù)的早期采納者,同時也是受益者。UHPLC在研究與開發(fā)領(lǐng)域被快速的接受,并逐漸成為標(biāo)準(zhǔn)的液相色譜平臺,雖然在QC實驗室的應(yīng)用速度慢一些。新的色譜柱技術(shù)可以更快和更有效的分析復(fù)雜樣品、手性分子和生物分子。zui后,液相色譜和2-D LC與高分辨率質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的快速進展,已經(jīng)*改變了生命科學(xué)的研究,并將會在臨床診斷方面產(chǎn)生更大的影響。這些進展得到了在快速發(fā)展的藥物開發(fā)領(lǐng)域工作的分析化學(xué)家的歡迎。
液相色譜的另一個重要的好處是其對復(fù)雜樣品的分離能力。這方面常常被忽視,在文獻中也很少報道。在合理的時間跨度(~1 h)內(nèi),400至1000范圍內(nèi)的峰容量(PC)已經(jīng)通過使用液相色譜來證實。峰容量是分辨率為1.0時,色譜圖上可以分辨的色譜峰個數(shù);通常傳統(tǒng)的HPLC為200左右。有史以來*次,液相色譜可以在單一維度,對復(fù)雜的藥品、天然材料、和其他困難樣品基質(zhì)提供更有效的分析。通過兩個應(yīng)用 (植物提取物和*的消化蛋白質(zhì))來說明Pc>300時,當(dāng)前液相色譜的高分辨分離能力。
液相色譜色譜柱技術(shù)的近期進展已經(jīng)被廣泛地綜述(已經(jīng)有很多文獻綜述并討論了HPLC的色譜柱技術(shù)的近期進展)??偨Y(jié)了重大行業(yè)使用率較高的,用于提高生產(chǎn)力、穩(wěn)定性、選擇性或保留時間(亞2μm,核殼粒子,混合物,新奇的鍵合反應(yīng),HILIC)或?qū)I(yè)應(yīng)用 (手性化合物或生物分子)的色譜柱。
液相色譜的其他優(yōu)勢包括溶劑節(jié)省(5-15倍),增強的質(zhì)量靈敏度(3-10倍),以及在保留時間(2–3倍)和峰面積(<0.1%RSD)方面的性能。注意,有關(guān)液相色譜中UV檢測靈敏度增加的報告往往會產(chǎn)生誤導(dǎo),因為質(zhì)量敏感度(分析物注入量)主要與柱的空隙體積有關(guān)。通常,液相色譜不會增加濃度靈敏度(的一種靈敏度),因為我們不能希望使用小的流通池來增加信噪比,除非延長流通池的路徑長度 (如60毫米)。泵混合而導(dǎo)致的粘性發(fā)熱、基線擾動以及方法轉(zhuǎn)移等潛在問題已經(jīng)有文獻描述,而且這些問題分別也是與特定的儀器相關(guān)聯(lián)的。一般來說,這些技術(shù)問題已經(jīng)研究得比較清楚了,而且通過選擇合適的系統(tǒng)配置(如混合器體積)能夠很容易地減輕。但是, 由于培訓(xùn)、與驗證數(shù)據(jù)系統(tǒng)的兼容性和其他方法轉(zhuǎn)移的問題,液相色譜在QC實驗室的應(yīng)用仍然比較浪費時間。
液相色譜色譜柱技術(shù)的近期進展已經(jīng)被廣泛地綜述(已經(jīng)有很多文獻綜述并討論了HPLC的色譜柱技術(shù)的近期進展)。總結(jié)了重大行業(yè)使用率較高的,用于提高生產(chǎn)力、穩(wěn)定性、選擇性或保留時間(亞2μm,核殼粒子,混合物,新奇的鍵合反應(yīng),HILIC)或?qū)I(yè)應(yīng)用 (手性化合物或生物分子)的色譜柱。