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ELISA試驗的樣本預備

來源:上海晶抗生物工程有限公司   2017年05月02日 09:38  

                                                                                

ELISA試劑盒在搜集樣本前都有必要有一個完好的方案,有必要明白要檢查的成份是否足夠安穩(wěn)。對搜集后當天就進行
檢查的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。關于隔天再檢查的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,在-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應防止重復凍融?/p>


液體類標本:  包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝結10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的請求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
3. 尿液:
用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實施。
4. 細胞培養(yǎng)上清:
檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢查細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml左右。經過重復凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
6. 安排標本
切割標本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本融化后仍然堅持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取試劑, 用手藝或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢查,其他冷凍備用。

 

植物安排:首先要稱取樣本的鮮重,樣本分量不能低于50mg。

1,勻漿液通常選擇PBS(PH=7.2-7.4)濃度為0.01mol/L。
2,勻漿的份額為10%,即1g安排加9ml的勻漿液
3,堅持樣本為鮮重。
4,樣本分量不能低于50mg
5,樣本溶解依照10%的份額,即1g安排加9ml的勻漿液進行溶解
6,勻漿液選擇PBS

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