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如果你在真核系統(tǒng)上開(kāi)展生物學(xué)研究，那么你有很大的機(jī)會(huì)要培養(yǎng)細(xì)胞。作為實(shí)驗(yàn)的原材料，細(xì)胞的狀態(tài)很重要。不過(guò)，如今的實(shí)驗(yàn)室中有無(wú)數(shù)的細(xì)胞系，每一種都有其*的生長(zhǎng)特性，研究人員如何才能確定細(xì)胞培養(yǎng)物是健康的？

各大廠商已開(kāi)發(fā)出一系列工具來(lái)監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)物。一些是專門(mén)的檢測(cè)，來(lái)監(jiān)控藥物篩選等應(yīng)用中的細(xì)胞變化。當(dāng)然，更多的是用于日常的細(xì)胞培養(yǎng)。在此，我們就來(lái)看看你有哪些選擇。

流式檢測(cè)

細(xì)胞健康并沒(méi)有一個(gè)定義。MilliporeSigma流式細(xì)胞應(yīng)用的研發(fā)主管Kamala Tyagarajan認(rèn)為，這個(gè)詞涵蓋了細(xì)胞的一切，包括細(xì)胞密度、倍增時(shí)間以及氧化應(yīng)激和凋亡狀態(tài)。不過(guò)，zui直接的指標(biāo)是細(xì)胞活力。

之前，細(xì)胞活力是利用*和臺(tái)盼藍(lán)來(lái)評(píng)估的。臺(tái)盼藍(lán)是一種無(wú)法透過(guò)細(xì)胞膜的染料，這意味著它會(huì)被健康細(xì)胞排斥，而只能進(jìn)入細(xì)胞膜受損的細(xì)胞。研究人員將染料與細(xì)胞混合，并移液至*，在獲得細(xì)胞計(jì)數(shù)的同時(shí)評(píng)估多少是活的。這個(gè)過(guò)程可以自動(dòng)化，比如Bio-Rad的TC20自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器。不過(guò)，你也可以選擇放棄臺(tái)盼藍(lán)，而轉(zhuǎn)投流式細(xì)胞儀的懷抱。

比如，MilliporeSigma的Muse® Count & Viability Assay就使用了兩種熒光染料的混合物，一種可染色所有有核的細(xì)胞，另一種則染色無(wú)活力的細(xì)胞。通過(guò)在Muse細(xì)胞分析儀上分析染色的細(xì)胞，研究人員可獲得樣品中的細(xì)胞總數(shù)和活細(xì)胞數(shù)量。

據(jù)Tyagarajan介紹，MilliporeSigma為Muse細(xì)胞分析儀開(kāi)發(fā)了超過(guò)25種檢測(cè)，其中有10種可評(píng)估細(xì)胞健康，同時(shí)還為其他流式細(xì)胞儀（如Guava easyCyte系統(tǒng)）開(kāi)發(fā)了其他檢測(cè)。這些檢測(cè)可監(jiān)控凋亡、氧化應(yīng)激、線粒體健康以及細(xì)胞周期狀態(tài)。

Bio-Rad的CytoTrack™檢測(cè)也是基于流式細(xì)胞儀，可監(jiān)控細(xì)胞增殖。該公司細(xì)胞生物學(xué)的產(chǎn)品Chris Linnevers表示，CytoTrack根據(jù)特定染料的豐度來(lái)提供細(xì)胞增殖的量度。在CytoTrack檢測(cè)中，染料被上樣到細(xì)胞中，隨著細(xì)胞的分裂，每個(gè)細(xì)胞中的染料數(shù)量降至一半。通過(guò)流式細(xì)胞儀的分析，研究人員可計(jì)算細(xì)胞分裂了多少次。

成像檢測(cè)

許多公司，包括Bio-Rad、Essen Bioscience和GE Healthcare，也開(kāi)發(fā)出成像平臺(tái)，能夠捕獲形態(tài)變化，從而監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)物。

比如，Bio-Rad的ZOE™熒光細(xì)胞成像儀是一個(gè)臺(tái)式手動(dòng)顯微鏡，將平板電腦那樣的界面與倒置顯微鏡和數(shù)字熒光成像能力融為一體。ZOE具有一個(gè)明視場(chǎng)和三個(gè)熒光通道，“是常規(guī)監(jiān)控細(xì)胞健康的好工具，特別是表達(dá)熒光蛋白的細(xì)胞”。即便如此，研究人員也可使用該公司的VivaFix™試劑，這種染料可與伯胺結(jié)合，利用活細(xì)胞和死細(xì)胞之間的染色強(qiáng)度來(lái)區(qū)分它們。

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