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人(Human)補體C3 ELISA 檢測試劑盒

來源:上海酶聯(lián)生物耗材有限公司   2014年12月16日 10:36  

               人(Human)補體C3 ELISA 檢測試劑盒
 

試驗原理:
C3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知C3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將C3和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中C3的濃度呈比例關(guān)系

使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
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Ab-(005)-04158    Pancreatic Lipase 胰脂肪酶抗體    ,品牌:    公司提供Santa、Abcam、MBL、CST等抗體品牌    ,規(guī)格:    0.1ml
Ab-(005)-04159    RPH3AL Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體    ,品牌:    公司提供Santa、Abcam、MBL、CST等抗體品牌    ,規(guī)格:    0.2ml
Ab-(005)-04160    phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體    ,品牌:    公司提供Santa、Abcam、MBL、CST等抗體品牌    ,規(guī)格:    0.1ml
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