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我們先來了解一下究竟什么是分光光度法,請(qǐng)看下面的原理圖:(以下圖片略)
分光光度法校準(zhǔn)原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體____溶劑(英文solution),通過移液器量取后注入目標(biāo)容器內(nèi),然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長(zhǎng)的光后,再對(duì)剩余的特定的波長(zhǎng)的光進(jìn)行測(cè)量,從而由此計(jì)算出移液器實(shí)際吸取和排出的液體??v觀分光光度法校準(zhǔn)的原理可見,在采用分光光度法對(duì)移液器校準(zhǔn)的過程中,可能對(duì)校準(zhǔn)結(jié)果帶來影響的因素主要有:
1 溫度,因?yàn)榉止夤舛确ㄍ瑯有枰褂玫揭后w即溶劑,一定量的溶劑,其容積同樣受到溫度的影響而變化;
但如果在用戶所在的場(chǎng)所對(duì)其移液器進(jìn)行校準(zhǔn),則此影響可以不計(jì),因?yàn)?,某一個(gè)具體用戶所在的場(chǎng)所內(nèi)的溫度變化,相對(duì)來說是固定的,那么這種由溫度帶來的對(duì)分光光度法校準(zhǔn)中容積的影響,同樣也會(huì)存在于用戶實(shí)際工作中,因此這兩者是可以相互抵消的;
2 氣壓,同溫度帶來的影響一樣,由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的;
3 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響,因?yàn)榉止夤舛确ㄊ强梢员恢苯釉诮K端用戶使用場(chǎng)所應(yīng)用的一種移液器校準(zhǔn)方法,其操作方法相對(duì)于傳統(tǒng)的衡量法更為簡(jiǎn)單、可靠,因此,*可有移液器的使用者來直接對(duì)其使用的移液器采用分光光度法進(jìn)行校準(zhǔn),因此,操作者的操作習(xí)慣在校準(zhǔn)過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中,因此,這兩者之間的差異也可以相互抵消的;
4 環(huán)境濕度,因?yàn)榉止夤舛确ú皇菍?duì)移液器排出的溶劑進(jìn)行稱量,而是對(duì)溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進(jìn)行測(cè)量,同時(shí),這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的,因此在整個(gè)測(cè)試過程中,其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑,無論其質(zhì)量如何變化,但結(jié)果是不會(huì)受到影響的,也就是不需要對(duì)環(huán)境的干濕度進(jìn)行控制。
因此,我們幾乎可以說,針對(duì)移液器采用分光光度發(fā)進(jìn)行校準(zhǔn),其整個(gè)的測(cè)試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的,如溫度、氣壓、干濕度等,同時(shí)因在這一校準(zhǔn)過程中,校準(zhǔn)人和zui終使用人是同一人,從而因人的因素而帶來的差異也是降到zui低的。
在采用分光光度法對(duì)移液器實(shí)施校準(zhǔn)的過程中,*不可被抵消的差異是分光光度法設(shè)備及試劑自身存在的誤差,這與傳統(tǒng)的衡量法里測(cè)量?jī)x器自身的誤差一樣,比如電子天平自身的誤差、溫度計(jì)自身的誤差、干濕度計(jì)一級(jí)氣壓計(jì)自身的誤差等,但這些來自于測(cè)量設(shè)備、溶劑自身的誤差,通常是恒定的,并且是可以事先測(cè)量的,可以通過的測(cè)量數(shù)據(jù)進(jìn)行修正的方法來避免的。
當(dāng)然,目前分光光度法作為一種針對(duì)移液器校準(zhǔn)的新的應(yīng)用方法還是剛剛興起,在國(guó)外也只有少數(shù)研究機(jī)構(gòu)貨實(shí)驗(yàn)室在使用,在我國(guó)國(guó)內(nèi),目前僅僅停留在理論層面的評(píng)估上,并沒有在實(shí)際中推廣、應(yīng)用。但因?yàn)榉止夤舛确ú皇墉h(huán)境因素干擾,使得其應(yīng)用環(huán)境更為隨意、寬廣,因此筆者人為,這種新型的針對(duì)移液器校準(zhǔn)的方法,在不久的將來,將會(huì)得到更多用戶的肯定與承認(rèn)。
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