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更新時間:2017-08-26 09:30:32瀏覽次數(shù):279次
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適用領域 | 科研 |
產品名稱:α-酮戊二酸含量試劑盒
規(guī)格:100T
測試方法:高效液相色譜法
測定意義:α-酮戊二酸是微生物三羧酸循環(huán)中重要的代謝中間產物,是連接細胞內碳-氮代謝的關鍵節(jié)點,在循環(huán)中的位置位于異檸檬酸之后以及琥珀酰*之前。在這一部位,回補反應可以通過自*的轉氨基作用產生α-酮戊二酸而達到補充此中間代謝產物的目的。
α-酮戊二酸含量試劑盒主要特點為:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度**是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
α-酮戊二酸含量試劑盒目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。咨詢!
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速.
注意事項:
1.檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩(wěn)定20分鐘左右。
2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。
3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩(wěn)定。
4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數(shù)據(jù)的準確性。
5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
6.實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
操作流程:
1. 植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO)ELISA試劑盒進口國產從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
121285-200301
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