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J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-08-11 21:31:34瀏覽次數(shù):173次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸
英文名稱:J774A.1(mouse macrophage)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0925
J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

CLIA Kit for Neuroblastoma, Suppression Of Tumorigenicity 1 (NBL1)        Mus musculus (Mouse)
氨肽酶O(APO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Aminopeptidase O (APO)        Homo sapiens (Human)
阿片肽(OP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Opioid Peptide (OP)        General
血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7)        Homo sapiens (Human)
膽酸(CA)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Cholic Acid (CA)        General
脫氧膽酸(DC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Deoxycholate (DC)        General
組蛋白(HIS)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Histone (HIS)        Homo sapiens (Human)
補(bǔ)體成分4c(C4c)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Compleme Compone 4c (C4c)        Homo sapiens (Human)
激活素A(ACVA)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Activin A (ACVA)        Homo sapiens (Human)
白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM)        Homo sapiens (Human)
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)        Homo sapiens (Human)
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)        CLIA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)        Mus musculus (Mouse)
雙調(diào)蛋白(AREG)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    現(xiàn)貨供應(yīng)    CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)    英文名稱:    Homo sapiens (Human)
腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    *    CLIA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)    英文名稱:    Homo sapiens (Human)
骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    進(jìn)口、分裝    CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)    英文名稱:    Homo sapiens (Human)
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    進(jìn)口、原裝    CLIA Kit J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)運(yùn)輸for Cadherin, Epithelial (CDHE)    英文名稱:    Homo sapiens (Human)
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    現(xiàn)貨供應(yīng)    CLIA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CF)    英文名稱:    Rattus norvegicus (Rat)
紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    *    CLIA Kit for Erythropoietin (EPO)    英文名稱:    Homo sapiens (Human)
紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    進(jìn)口、分裝    CLIA Kit for Erythropoietin (EPO)    英文名稱:    Mus musculus (Mouse)
E選擇素(SELE)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    進(jìn)口、原裝    

 

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