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MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片

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更新時(shí)間:2017-08-11 16:31:36瀏覽次數(shù):140次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片
英文名稱:MuM-2C(humanchoroidalmelanoma cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0848
MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MU IgG  流行性腮腺炎病毒 IgG(間接法二步法)             
MU IgM  流行性腮腺炎病毒 IgM(間接法二步法)             
EPBV IgG  乙型腦炎病毒 IgG(間接法二步法)             
EPBV IgM  乙型腦炎病毒 IgM(間接法二步法)             
Beta-HCG  人絨毛膜*(夾心法一/二步法)             96T
IL-1 Beta ELISA Kit  魚類白介素1β             96T
Plg (Rabbit Plasminogen) ELISA Kit  兔子纖溶酶原             96T
Mouse Cluster of differeiation 19,CD19 ELISA Kit  小鼠CD19分子             96T
GlyCAM-1(Human glycosylation-depende cell adhesion molecule-1) ELISA Kit  人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子             96T
FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit  大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10             96T
Alb  白蛋白(夾心法一步法)             96T
HAV IgM  抗-HAV IgM(夾心法 一步法)              
HAV IgG  抗-HAV (總)競(jìng)爭(zhēng)法一步法             
  抗抗體 IgG(間接法二步法)              
  抗抗體 IgM(間接法二步法)             
BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) ELISA Kit  兔骨形成蛋白             96T
IRF(Human ierferon Regulatory Factor) ELISA Kit  人干擾素調(diào)節(jié)因子             96T
sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit  大鼠分泌型磷脂酶A2             96T
Mouse Cluster of differeiation 3,CD3 ELISA Kit  小鼠CD3分子             96T
VTG ELISA Kit  鯉魚卵黃蛋白原             96T
GnRH ELISA Kit   魚類*釋放激素             96T
OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit  兔骨保護(hù)素             96T
LTB(Human lymphotoxin Beta) ELISA Kit  人淋巴毒素β             96T
AFP-L3 ELISA Kit   小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3             96T
MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)圖片cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit  大鼠胞漿型磷脂酶A2             96T
LTA (Human lymphotoxin Alpha,LTA) ELISA Kit  人淋巴毒素α             96T
Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit  魚類三碘甲狀腺原氨酸             96T
Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit  兔胰淀素    

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