產品名稱：HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸
英文名稱：HCCLM3(highly metastatic human hepatocellular carcinoma cell)
規(guī)格：5×105cells/瓶
產品貨號：FS-X0834
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得。
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

KIT  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ             96T
TGF- Beta1(Human Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit  人轉化生長因子β1             96T
HL ELISA Kit  大鼠肝脂酶             96T
Mouse trypsin ELISA Kit  小鼠*             96T
N-AChR ELISA Kit  大鼠煙堿型乙酰*受體             48T96T
TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha) ELISA Kit  人轉化生長因子α             96T
ODF(Mouse osteoclast differeiation factor) ELISA Kit  小鼠破骨細胞分化因子             96T
M-AChR ELISA Kit   大鼠毒蕈堿型乙酰*受體             96T
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA kit  小鼠Toll樣受體9             96T
SDF-1 Beta/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit  人基質細胞衍生因子1β             96T
SCFR(Human Stem Cell Factor Receptor) ELISA kit  人干細胞因子受體             96T
Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit  小鼠鉤端螺旋體IgG             96T
APC ELISA Kit  大鼠活化蛋白C             96T
GAL ELISA Kit  大鼠甘丙肽/甘丙素             96T
GHRP-Ghrelin(Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit  小鼠生長激素釋放肽ghrelin             96T
SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit  人干細胞因子/肥大細胞生長因子             96T
sCD40L(Human Soluble Cluster of differeiation 40 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD40配體             96T
vaspin(Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  小鼠內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑             96T
a-Glu ELISA Kit  大鼠α葡萄糖苷酶             96T
ODF ELISA Kit  大鼠破骨細胞分化因子             96T
BrdU(Mouse Bromodeoxyuridine) ELISA Kit  小鼠溴脫氧核苷*             96T
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸sCD30L(Human Soluble Cluster of differeiation 30 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD30配體             96T
RAES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit  人正常T細胞表達和分泌因子             96T
TGF Beta2(Mouse transforming growth factor Beta2) ELISA Kit  小鼠轉化生長因子β2             96T
TLR-9/CD289 ELISA kit   大鼠Toll樣受體9             96T
Lep IgG ISA Kit   大鼠鉤端螺旋體IgG             96T
Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  小鼠α1微球蛋白             96T
P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) ELISA kit  人P選擇素             96T