當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞>>正常細(xì)胞>> A-427(人肺癌細(xì)胞)保存運(yùn)輸
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:劉小姐查看聯(lián)系方式
更新時間:2017-08-11 15:49:47瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:A-427(人肺癌細(xì)胞)保存運(yùn)輸
英文名稱:A-427(lung cancer cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0810
A-427(人肺癌細(xì)胞)保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
A-427(人肺癌細(xì)胞)保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
5-HT ELISA Kit 大鼠5羥色胺 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黃體生成素釋放激素 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-R ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)受體 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit 小鼠腦紅蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8異前列腺素 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP ELISA Kit 大鼠P物質(zhì) 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
AFU ELISA Kit 大鼠αL巖藻糖苷酶 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MP-Ab(Human Mycoplasma pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎支原體抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
IFI16/p16(Mouse interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TPO ELISA Kit 大鼠甲狀腺過氧化物酶 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SDF-1a/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Cpn-Ab(Human Chlamydia pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎衣原體抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VEGF(Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LRP(Human Lung resistance-related protein) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
A-427(人肺癌細(xì)胞)保存運(yùn)輸PI ELISA Kit 大鼠胰島素 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰* 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SP-A(Human Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。