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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-11 15:29:51瀏覽次數(shù):314次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)圖片
英文名稱:Tca-8113(human tongue squamous cell carcinoma cell line)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0788
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)圖片的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)圖片培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
MMP-1 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠乙酰* 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞核周抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
cANCA(human anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-10 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit 人抗凝血素抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-13 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 小鼠穿孔素 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-3 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-7 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit 人組織蛋白酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MMP-8 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)圖片LF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
BPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit 人抗殺菌通透性增高蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
5-NT ELISA Kit 大鼠5核苷酸酶 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MPO-ANCA IgG(Human myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA kit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體
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