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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞>>正常細(xì)胞>> STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)*
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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-08-11 15:24:19瀏覽次數(shù):141次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)WPMY-1(人正常前列基質(zhì)永生化細(xì)胞)價(jià)格
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞)*
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)價(jià)格
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)*
英文名稱:STO(mouseembryo fibroblast)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0778
STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)*的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Free-T3 ELISA Kit 大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
NN-T4 ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
HCV-IgG(Human Hepatitis C virus IgG) ELISA Kit 人丙型肝炎IgG 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
gp130(Human glucoprotein 130) ELISA KIT 人糖蛋白130 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
INS ELISA Kit 大鼠胰島素 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
C-Peptide ELISA Kit 大鼠C肽 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
CRF(Human corticotropin-releasing factor) ELISA Kit 人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
dDAVP(Human */1-desamino-8-D-arginine vasopressin) ELISA Kit 人*/1-去氨基-8-右旋-*加壓素 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
CG ELISA Kit 大鼠絨毛膜* 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
M-AChR M3(Human muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LH ELISA Kit 大鼠促黃體激素 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
AMA ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睪酮受體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ACA ELISA Kit 大鼠抗中性粒/中心體抗體 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
M-AChR(Human muscarinic acetylcholine receptor) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰*受體 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Gp49a(Human glycoprotein 49A) ELISA Kit 人糖蛋白49A 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)*CPSA ELISA Kit 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
trypsin ELISA Kit 大鼠* 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GHRP-Ghrelin(Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
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