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品 牌
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-11 15:19:42瀏覽次數(shù):104次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片
英文名稱:SK-Hep-1(human hepatomacells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0770
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
* 供應(yīng)規(guī)格: 96T
8-OHdG(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人8羥基脫氧鳥苷 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羥賴氨酸 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GAP(Human GTPase activating protein) ELISA Kit 人GTP酶活化蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白H * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Human preptin ELISA Kit 人preptin * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白E 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit 人成骨生長肽 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 人破骨細(xì)胞分化因子 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原吡啶交聯(lián) 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人脫氧膠原吡啶交聯(lián) 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人膠原吡啶交聯(lián) 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit 人葡萄球菌蛋白A * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit 人刀豆素A 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit 人脂多糖結(jié)合蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人*過氧化酶 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GSH(Human glutathione) ELISA Kit 人* 進(jìn)口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit 人17-酮類固醇 進(jìn)口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit 人17羥皮質(zhì)類固醇 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白酶K * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 人骨形成蛋白
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