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SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸

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更新時間:2017-08-11 15:18:29瀏覽次數(shù):99次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產品名稱:SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸
英文名稱:SiHa(human cervicalsquamous cell carcinoma)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產品貨號:FS-X0768
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得。
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HDL-C(Human High density lipoprotein cholesterol) ELISA Kit  人高密度脂蛋白*    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
N-MID-OT(Human N-MID Osteocalcin) ELISA Kit  人N端中段骨鈣素    *    供應規(guī)格:     96T
LRP-6(Human low-density lipoprotein-receptor-related protein) ELISA Kit  人低密度脂蛋白受體相關蛋白6    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit  人極低密度脂蛋白受體    進口/分裝    供應規(guī)格:     96T
LDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit  人低密度脂蛋白受體    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
HDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit  人高密度脂蛋白    *    供應規(guī)格:     96T
Alpha-GST(Human Alpha-glutathione S-transferases) ELISA Kit  人α*S轉移酶    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
GSH-Px kit(human)  人*過氧化物酶elisa試劑盒    進口/分裝    供應規(guī)格:     96T
Hcy(Human Homocysteic acid) ELISA Kit  人同型半*    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
FFA(Human free fatty acids) ELISA Kit  人游離脂肪酸    *    供應規(guī)格:     96T
ON(Human osteonectin) ELISA Kit  人骨粘連蛋白    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
FA(Human Folic acid) ELISA Kit  人*    進口/分裝    供應規(guī)格:     96T
ET(Human endotoxin) ELISA Kit  人內毒素    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ    *    供應規(guī)格:     96T
CsA(Human Cyclosporine A) ELISA Kit  人*A    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人神經膠質纖維酸性蛋白    進口/分裝    供應規(guī)格:     96T
15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELISA Kit  人15脂加氧酶    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
CETP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人*酯轉移蛋白    *    供應規(guī)格:     96T
LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit  人白三烯C4    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞)保存運輸Cyt-C(Human Cytochrome-C) ELISA Kit  人*    進口/分裝    供應規(guī)格:     96T
LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit  人脂蛋白脂酶    現(xiàn)貨供應    供應規(guī)格:     96T
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶同工酶II    *    供應規(guī)格:     96T
GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶同工酶MM    進口/原裝    供應規(guī)格:     96T
GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶

 

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