當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞>>正常細胞>> RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*
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更新時間:2017-08-11 14:55:06瀏覽次數(shù):128次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)*
WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)價格
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*
英文名稱:RAW 264.7(leukemia cellsin mouse macrophage)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0748
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit 人抗著絲點抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌細胞生成素 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit 人N端外顯肽 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷酸腺苷 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit 人蛋白聚糖 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit 人吡啶酚 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit 人5羥基吲哚乙酸 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit 人12羥二十烷四烯酸 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit 人羥* 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
NO(Human nitric oxide) ELISA Kit 人一氧化氮 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒細胞活化肽78 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VC(Human Vitamin C) ELISA Kit 人* 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit 人*6 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit 人可溶性P選擇素 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VD(Human Vitamin D) ELISA Kit 人* 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit 人*1 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit 人*12 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人*3 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit 人*2 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*VE(Human Vitamin E) EELISA Kit 人* 進口/分裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人* 現(xiàn)貨供應(yīng) 供應(yīng)規(guī)格: 96T
GEF(Human Guanine Exchange Factor) ELISA Kit 人鳥苷酸交換因子 * 供應(yīng)規(guī)格: 96T
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人*受體 進口/原裝 供應(yīng)規(guī)格: 96T
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