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RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*

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更新時間:2017-08-11 14:55:06瀏覽次數(shù):128次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*
英文名稱:RAW 264.7(leukemia cellsin mouse macrophage)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0748
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit  人抗著絲點抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit  人肌細胞生成素    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit  人A組鏈球菌菌壁多糖抗體    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit  人活化蛋白C抵抗素    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit  人N端外顯肽    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SC(Human secretory component) ELISA Kit  人分泌成分    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit  人二磷酸腺苷    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit  人蛋白聚糖    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit  人吡啶酚    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit  人5羥基吲哚乙酸    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit  人12羥二十烷四烯酸    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit  人羥*    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
NO(Human nitric oxide) ELISA Kit  人一氧化氮    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit  人上皮中性粒細胞活化肽78    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VC(Human Vitamin C) ELISA Kit  人*    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit  人*6    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit  人可溶性P選擇素    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD(Human Vitamin D) ELISA Kit  人*    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit  人*1    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit  人*12    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit  人*3    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit  人*2    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)*VE(Human Vitamin E) EELISA Kit  人*    進口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit  人*    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GEF(Human Guanine Exchange Factor) ELISA Kit  人鳥苷酸交換因子    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit  人*受體    進口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T

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