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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-07 16:20:28瀏覽次數(shù):121次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:人膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基*
英文名稱:Human bladder epithelial cell medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0243
人膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
人膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基*收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
蛇膽汁 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120938-200104 規(guī)格: 20mg/支
首烏藤 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120939-200705 規(guī)格: 20mg/支
獨活 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120940-2001010 規(guī)格: 20mg/支
三七 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120941-200807 規(guī)格: 20mg/支
干姜 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120942-200907 規(guī)格: 20mg/支
廣山楂 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120943-200402 規(guī)格: 20mg/支
天麻 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120944-200608 規(guī)格: 20mg/支
白芷(杭白芷) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120945-201008 規(guī)格: 20mg/支
西青果 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120946-9903 規(guī)格: 20mg/支
防風 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120947-200907 規(guī)格: 20mg/支
返魂草(麻葉千里光) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120948-200903 規(guī)格: 20mg/支
郁金(溫郁金) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120949-201005 規(guī)格: 20mg/支
茵陳(濱蒿) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120950-200706 規(guī)格: 20mg/支
前胡(白花前胡) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120951-200704 規(guī)格: 20mg/支
降香 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120952-201007 規(guī)格: 20mg/支
桃仁(桃) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120953-200705 規(guī)格: 20mg/支
餓螞蝗 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120954-人膀胱上皮細胞*培養(yǎng)基*200204 規(guī)格: 20mg/支
黃芩 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120955-200607 規(guī)格: 20mg/支
紫菀 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120956-200505 規(guī)格: 20mg/支
墨旱蓮 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120958-200605 規(guī)格: 20mg/支
瓦松 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120959-200303 規(guī)格: 20mg/支
相思子 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120960-200203 規(guī)格: 20mg/支
狼毒(月腺大戟) 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120961-200303 規(guī)格: 20mg/支
湖北貝母 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120962-200904 規(guī)格: 20mg/支
干蟾皮 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120963-200504 規(guī)格: 20mg/支
千里光 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120964-200707 規(guī)格: 20mg/支
木芙蓉葉 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120965-200703 規(guī)格: 20mg/支
仙鶴草 進口/國產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 120966-200505 規(guī)格: 20mg/支
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