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HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸

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更新時間:2017-08-07 13:30:02瀏覽次數(shù):139次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸
英文名稱:HUMnormalhuman aortic smooth muscle cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0084
HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

        10mg
桑色素    英文名稱:    Morin    :    480-16-0    分子式:    C15H10O7    302.24    20mg
桑皮苷A    英文名稱:    mulberroside A    :    102841-42-9    分子式:            20mg
桑皮苷C    英文名稱:    Mulberroside C    :    102841-43-0    分子式:            20mg
桑根酮 C     英文名稱:    Sanggenon C    :    80651-76-9    分子式:    C40H36O12    708.712    20mg
桑根酮 D      英文名稱:    Sanggenon D    :    81422-93-7    分子式:    C40H36O12    708.7066    20mg
D-*    英文名稱:    D-Pinitol    :    10284-63-6    分子式:    C7H14O6    194.18    20mg
山姜素    英文名稱:    Alpinetin     :    36052-37-6    分子式:    C16H14O4    270.28    20mg
水晶蘭苷    英文名稱:    Monotropein    :    5945-50-6    分子式:    C16H22O11    390.34    20mg
鼠李糖    英文名稱:    L-Rhamnose monohydrate    :    6155-35-7    分子式:    C6H14O6    182.17    20mg
穗花杉雙黃酮    英文名稱:    Amentoflavone    :    1617-53-4    分子式:    C30H18O10    538.46    20mg
斯皮諾素    英文名稱:    Spinosin    :    72063-39-9    分子式:    C28H32O15    608.546    20mg
酸棗仁皂苷A    英文名稱:    Jujuboside A    :    55466-04-1    分子式:    C58H94O26    1207.35    20mg
酸棗仁皂苷B    英文名稱:    Jujuboside B    :    55466-05-2    分子式:    C52H84O21    1045.21    20mg
酸棗仁皂苷A1    英文名稱:    Jujuboside A1    :    194851-84-8    分子式:            10mg
酸棗仁皂苷B1    英文名稱:    Jujuboside B1    :    68144-21-8    分子式:            10mg
松脂醇二葡萄糖苷    英文名稱:    Pinoresinol diglucoside    :    63902-38-5    分子式:    C32H42O16    682.668    20mg
桃葉珊瑚苷    英文名稱:    Aucubin    :    479-98-1    分子式:    C15H22O9    346.33    20mg
商陸皂苷甲    英文名稱:    Esculentoside A    :    65497-07-6    分子式:    C42H66O16     826.96    20mg
商陸皂苷元    英文名稱:    Phytolaccagenin    :     1802-12-6    分子式:     C31H48O7    532.71    20mg
三葉豆紫檀苷    英文名稱:    Trifolirhizin    :    6807-83-6    分子式:    C22H22O10    446.4    20mg
水仙苷    英文名稱:    Narcissoside    :    604-80-8    分子式:   HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸 C28H32O16     624.54    10mg
沙苑子苷A    英文名稱:    Complanatoside A    :    146501-37-3    分子式:    C28H32O16         20mg
α-三聯(lián)噻吩    英文名稱:    α-Terthiophene    :    1081-34-1    分子式:    C12H8S3    248.39    20mg

 

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