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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-07 13:30:02瀏覽次數(shù):139次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸
英文名稱:HUMnormalhuman aortic smooth muscle cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0084
HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
10mg
桑色素 英文名稱: Morin : 480-16-0 分子式: C15H10O7 302.24 20mg
桑皮苷A 英文名稱: mulberroside A : 102841-42-9 分子式: 20mg
桑皮苷C 英文名稱: Mulberroside C : 102841-43-0 分子式: 20mg
桑根酮 C 英文名稱: Sanggenon C : 80651-76-9 分子式: C40H36O12 708.712 20mg
桑根酮 D 英文名稱: Sanggenon D : 81422-93-7 分子式: C40H36O12 708.7066 20mg
D-* 英文名稱: D-Pinitol : 10284-63-6 分子式: C7H14O6 194.18 20mg
山姜素 英文名稱: Alpinetin : 36052-37-6 分子式: C16H14O4 270.28 20mg
水晶蘭苷 英文名稱: Monotropein : 5945-50-6 分子式: C16H22O11 390.34 20mg
鼠李糖 英文名稱: L-Rhamnose monohydrate : 6155-35-7 分子式: C6H14O6 182.17 20mg
穗花杉雙黃酮 英文名稱: Amentoflavone : 1617-53-4 分子式: C30H18O10 538.46 20mg
斯皮諾素 英文名稱: Spinosin : 72063-39-9 分子式: C28H32O15 608.546 20mg
酸棗仁皂苷A 英文名稱: Jujuboside A : 55466-04-1 分子式: C58H94O26 1207.35 20mg
酸棗仁皂苷B 英文名稱: Jujuboside B : 55466-05-2 分子式: C52H84O21 1045.21 20mg
酸棗仁皂苷A1 英文名稱: Jujuboside A1 : 194851-84-8 分子式: 10mg
酸棗仁皂苷B1 英文名稱: Jujuboside B1 : 68144-21-8 分子式: 10mg
松脂醇二葡萄糖苷 英文名稱: Pinoresinol diglucoside : 63902-38-5 分子式: C32H42O16 682.668 20mg
桃葉珊瑚苷 英文名稱: Aucubin : 479-98-1 分子式: C15H22O9 346.33 20mg
商陸皂苷甲 英文名稱: Esculentoside A : 65497-07-6 分子式: C42H66O16 826.96 20mg
商陸皂苷元 英文名稱: Phytolaccagenin : 1802-12-6 分子式: C31H48O7 532.71 20mg
三葉豆紫檀苷 英文名稱: Trifolirhizin : 6807-83-6 分子式: C22H22O10 446.4 20mg
水仙苷 英文名稱: Narcissoside : 604-80-8 分子式: HUM 正常人主動脈平滑肌細(xì)胞保存運(yùn)輸 C28H32O16 624.54 10mg
沙苑子苷A 英文名稱: Complanatoside A : 146501-37-3 分子式: C28H32O16 20mg
α-三聯(lián)噻吩 英文名稱: α-Terthiophene : 1081-34-1 分子式: C12H8S3 248.39 20mg
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