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更新時間:2017-08-07 13:27:04瀏覽次數(shù):151次
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產品名稱:hDPSCs 人前磨牙牙髓干細胞保存
英文名稱:HDPSCs first molar dental pulp stem cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產品貨號:FS-X0078
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細胞保存的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得。
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細胞保存培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
14144-06-0 分子式: C33H52O8 576.76 20mg
原阿片堿 英文名稱: Protopine : 130-86-9 分子式: C20H19NO5 353.37 20mg
* 英文名稱: Etoposide : 33419-42-0 分子式: C29H32O13 588.56 20mg
鹽酸益母草堿 英文名稱: Leonurine hydrochloride : 24697-74-3 分子式: C14H22ClN3O5 347.79458 20mg
乙酰紫堇靈 英文名稱: Acetylcorynoline : 18797-80-3 分子式: C23H23NO6 20mg
紫堇靈 英文名稱: (+)-corynoline : 18797-79-0 分子式: C21H21NO5 367.399 20mg
脫氫紫堇堿 英文名稱: Dehydrocorydaline : 分子式: C22H24NO4 366.44 20mg
異鼠李素--3-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱: Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside : 5041-82-7 分子式: C22H22O12 478.4 20mg
鴨腳樹葉堿 英文名稱: 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester : 4684-32-6 分子式: C20H22N2O3 338.405 20mg
銀鍛苷 英文名稱: Tiliroside : 20316-62-5 分子式: C30H26O13 594.52 20mg
3-乙?;橄闼? 英文名稱: alpha-boswellic acid,3-acetyl : 分子式: 20mg
3-乙酰基-11-酮基乳香酸 英文名稱: beta-boswellic acid,3-acetyl,11-keto : 分子式: 20mg
異甜菊醇 英文名稱: Isosteviol : 27975-19-5 分子式: C20H30O3 318.45 10mg
鹽酸吐根酚堿 英文名稱: Cephaeline hydrochloride : 3738-70-3 分子式: C28H40Cl2N2O4 539.53 20mg
一枝蒿甲素 英文名稱: Bullatine A : 1354-84-3 分子式: C22H33NO2 20mg
異虎耳草素 英文名稱: Isopimpinellin : 482-27-9 分子式: 10mg
野漆樹苷 英文名稱: Rhoifolin : 17306-46-6 分子式: C27H30O14 578.52 20mg
女貞苷 英文名稱: ligustroflavone : 260413-62-5 分子式: C33H40O18 724.67 20mg
α-亞麻酸 英文名稱: Linolenic acid : 463-40-1 分子式: C18H30O2 278.43 20mg
洋艾素(95%) 英文名稱: Absinthin : 分子式: C20H20O8 388.37 20mg
異型南五味子丁素 英文名稱: Heteroclitin D : 分子式: 20mg
油酸 英文名稱: cis-9-Octadecenoic acid : 112-80-1 分子式: C18H34O2 282.46 20mg
雅姆皂苷元 英文名稱: Yamogenin : 512-06-1 分子式: 10mg
8-乙氧基滇烏堿(95%) 英文名稱: 8-O-ethylyunaconitine : 分子式: C35H51NO10 20mg
硬飛燕草堿 英文名稱: Delsoline : 509-18-2 分子式: C25H41NO7 467.599 20mg
蕓苔素內酯 英文名稱: Brassinolide : 72962-43-7 分子式: C28H48O6 480.68 20mg
一葉萩堿 英文名稱: Securinine : 5610-40-2 分子式: C13H15NO2 217.26 20mg
一枝蒿庚素 英文名稱: Bullatine G : 分子式: C22H31NO3 10mg
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細胞保存茵芋堿 英文名稱: Chloroxylonine : 83-95-4 分子式: C14H15NO4 261.27 20mg
異鼠李素-3-O-半乳糖苷 英文名稱: Isorhamnetin-3-O-galactoside : 6743-92-6 分子式: C22H22O12 "478.41
" 10mg
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