當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞>>正常細(xì)胞>> GC-1 鼠精原細(xì)胞操作方法
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:劉小姐查看聯(lián)系方式
更新時間:2017-08-07 13:26:03瀏覽次數(shù):141次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:GC-1 鼠精原細(xì)胞操作方法
英文名稱:GC-1ratspermatogonial stem cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0076
GC-1 鼠精原細(xì)胞操作方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
GC-1 鼠精原細(xì)胞操作方法收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
紫莖女貞苷A(95%) 英文名稱: Ligupurpuroside A : "147396-01-8
" 分子式: "C35H46O19
" "770.74
" 10mg
紫莖女貞苷B 英文名稱: Ligupurpuroside B : "147396-02-9
" 分子式: "C35H46O17
" "738.74
" 10mg
紫莖女貞苷C(95%) 英文名稱: Ligupurpuroside C : 分子式: "C35H46O17
" "738.74
" 10mg
紫莖女貞苷D (95%) 英文名稱: Ligupurpuroside D : 分子式: "C35H46O18
" "754.74
" 10mg
cis-紫莖女貞苷B (95%) 英文名稱: cis- Ligupurpuroside B : 分子式: "C35H46O17
" "738.74
" 10mg
蒼術(shù)素醇 英文名稱: : 分子式: 20mg
骨化二醇 英文名稱: Calcifediol : 63283-36-3 分子式: C27H44O2 400.64 20mg
* 英文名稱: Calcifediol : 19356-17-3 分子式: C27H44O2 400.64 10mg
雷帕霉素 英文名稱: Sirolimus : 53123-88-9 分子式: C51H79NO13 914.18 20mg
* 英文名稱: Tacrolimus : 104987-11-3 分子式: C44H69NO12 804.02 20mg
小檗紅堿 英文名稱: Berberrubine : 15401-69-1 分子式: C19H15NO4 321.33
去亞甲基小檗堿 英文名稱: : 分子式:
瑞枯靈 英文名稱: : 485-19-8 分子式:
歐夾竹桃苷 英文名稱: oleandrin : 分子式:
硫秋水仙苷 英文名稱: Acetamide : 分子式:
野馬追內(nèi)酯A 英文名稱: Eupalinolide A : 877822-41-8 分子式: 20mg
山茱萸新苷 英文名稱: Cornuside : 131189-57-6 分子式: 20mg
β,β-二甲基丙烯酰紫草素 英文名稱: β,β-Dimethylacrylshikonin : 24502-79-2 分子式: 20mg
白蠟樹精 英文名稱: Fraxinol : 486-28-2 分子式: 20mg
GC-1 鼠精原細(xì)胞操作方法異補骨脂二氫黃酮 英文名稱: "Isobavachin
" : 31524-62-6 分子式: 20mg
酚-3-葡萄糖鼠李糖苷 英文名稱: : 分子式: 20mg
靈芝酸A(97%) 英文名稱: : 分子式:
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。