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小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸

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更新時(shí)間:2017-08-07 11:15:45瀏覽次數(shù):228次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸
英文名稱:Mouse bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0052
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

人*(Cyt-C)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Crosslaps,Cr ELISA Kit
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit
人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
人白三烯B4(LTB4) ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA Kit
人脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human adiponectin,ADP ELISA Kit 
人組胺(HIS)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    human Histamine,HIS ELISA Kit 
人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    human Resistin ELISA Kit 
人骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 
人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
人*(cAMP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 
人*(AP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Aprotinin,AP ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit 
人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Phospholipase C,PLC ELISA Kit
人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human serine protease,PRSS ELISA Kit
人*(UK)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human urokinase,UK ELISA Kit
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)保存運(yùn)輸人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human Elastase ELISA Kit
人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit
人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human α-Amylase,AMS/AMY ELISA Kit
人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    Human alkaline 

 

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