當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> mRTEC 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-07 11:14:31瀏覽次數(shù):252次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞運(yùn)輸
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:mRTEC 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*
英文名稱:MRTECmouse renal tubular epithelial cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0050
mRTEC 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
mRTEC 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人端粒酶(TE)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human omerase,TE ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit
人尿蛋白(UP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Proteinuria,UP ELISA Kit
人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Aquaporin 2,AQP-2 ELISA Kit
人肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Troponin T,Tn-T ELISA Kit
人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human anti-Endostatin antibody,ES-Ab ELISA Kit
人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human heat shock protein 27,HSP-27 ELISA Kit
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human angiostatin,ANG ELISA Kit
人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human heart fatty acid binding protein,h-FABP ELISA Kit
人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Bradykinin,BK ELISA Kit
人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Myosin light Chain,MLC ELISA Kit
人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human α-Actinin 3,ACTN-3 ELISA Kit
人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
mRTEC 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit
人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Myosin,MYS ELISA Kit
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
人醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 human aldosterone
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