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RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)

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更新時間:2017-08-07 11:08:49瀏覽次數(shù):162次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng),冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)
英文名稱:RLFsrat lung fibroblasts
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0043
RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit
人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit
人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA Kit
人巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit
人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit
人胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA Kit
人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒    進口/分裝    human soluble cluster of differentiation 28,sCD28 ELISA Kit 
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit
人神經(jīng)細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 ELISA Kit
人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA Kit
人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISA Kit
人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISA Kit
人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-TAC ELISA Kit
人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISA Kit
人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit
人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human cluster Of differentiation,CD4 ELISA Kit
人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit
人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA Kit
人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit
人基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit
人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit
人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit
人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit
人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit
人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 
RLFs 大鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor,BAFF-R ELISA Kit
人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 
人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 
人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA Kit 
人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA Kit 
人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA Kit 
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand

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