當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> RN-h 大鼠海馬趾神經(jīng)元培養(yǎng)
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-07 11:02:52瀏覽次數(shù):154次
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:RN-h 大鼠海馬趾神經(jīng)元培養(yǎng)
英文名稱:RN-hrathippocampalneurons
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0033
RN-h 大鼠海馬趾神經(jīng)元培養(yǎng)的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
RN-h 大鼠海馬趾神經(jīng)元培養(yǎng)培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA Kit
人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 進口/分裝 Human anti-IgE receptor antibody ELISA Kit
人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 進口/分裝 Human anti-IVIgG antibody ELISA Kit
人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit
人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒 進口/分裝 human Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB ELISA Kit
人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 進口/分裝 human Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB ELISA Kit
人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 進口/分裝 human glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab ELISA Kit
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human plaet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit
人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human anti-lymphocyte globulin,ALG ELISA Kit
人抗*(AT)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Anti-trypsin,AT ELISA Kit
人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P ELISA Kit
人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Anti-Somatic Muscle Antibody,ASA ELISA Kit
人甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Thyroid Antibody,TAb ELISA Kit
人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human islet cell antibody,ICA ELISA Kit
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit
人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human mitotic spindle apparatus antibody,MSA ELISA Kit
人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Anti-keratin antibody,AKA ELISA Kit
人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit
人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒 進口/分裝 human anti-neutrophil cytoplasmic antibody,cANCA ELISA Kit
人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA Kit
人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒 進口/分裝 human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit
RN-h 大鼠海馬趾神經(jīng)元培養(yǎng)人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit
人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA Kit
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Lactoferrin antibody IgG,LF/LTF Ab-IgG ELISA Kit
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