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大鼠載脂蛋白2B(ApoB)elisa試劑盒操作程序
① 加抗體包被 → 4℃**,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值
試劑準(zhǔn)備
a.使用前所有試劑應(yīng)置于室溫平衡至少30分鐘。
b.本試劑盒可以直接加樣,如濃度過高,可以進(jìn)行適當(dāng)比例的稀釋(推薦2-5倍稀釋),計(jì)算時(shí)應(yīng)將結(jié)果乘以稀釋的倍數(shù)。
c.洗滌液為25倍濃縮液,使用前將所有洗滌液倒入500ml或1L的燒杯中,用雙蒸水定容到500ml即為工作液。
d.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:先用標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品凍干粉定容到150μl,然后漩渦混勻30秒即為標(biāo)準(zhǔn)品原液(24小時(shí)內(nèi)用完)。APOB試劑盒;大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒取5支干凈的Eppendorf管,每管加150μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,分別標(biāo)記上160ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L ,10ng/L .取150μl標(biāo)準(zhǔn)品原液加入標(biāo)記160ng/L 的管中,混勻后同樣取出150μl,加入下一管,以此類推直至后一管。零孔:直接加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液。
e.*抗原的稀釋:抽取*抗原稀釋液1ml到濃縮型*抗原中,漩渦混勻15秒至凍干粉*溶解,然后將所有液體移入稀釋液瓶中,再次漩渦混勻30秒即為*抗原工作液。
f.親和素-HRP的稀釋:低速離心(使?jié)饪s液全部沉到管底),將濃縮親和素-HRP全部移入相應(yīng)稀釋液中然后漩渦混勻30秒即為親和素-HRP工作液
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