elisa定量檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題明細(xì)
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA試劑盒各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，嚴(yán)格遵照劃定操縱，必能得出正確的結(jié)果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可濺出，不可產(chǎn)氣憤泡。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀的血清，可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份，ELISA試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。