小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；NIH/3T3培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

細(xì)胞名稱  小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；NIH/3T3培養(yǎng)
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細(xì)胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進(jìn)行轉(zhuǎn)化分析的亞株，建立的NIH/3T3細(xì)胞株又進(jìn)行了5輪以上亞克隆。該細(xì)胞株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代　
傳代情況  C84
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性　
STR   STR 鑒定
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；NIH/3T3培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1，2，6-己三醇25克2～8℃，避光

(E)-1,2-二錄烯(含穩(wěn)定劑氧基輕醌) TRcNS-1,2-DICHLOROqTHYLqNq 126-60-2

4-Chloropxenylhydrezine xy7nochloride 1073-70-7

4-溴異丙苯 1-Bromo-4-isopropylbenzene,≥95.0% 586-61-8 1ML 通用試劑

β-葡聚糖/β-D-葡聚糖/β-D-Glucan from barley 試劑 50、100、500、1000mg gersion
1,5-disulfonicacid阿姆斯特朗酸1克高純，98%

923-32-0DL-胱酸;DL-3,3′-二硫代雙(2-基丙酸); DL-雙硫代丙酸DL-Cystine;

Lipase(Candida)脂肪水解酶25克BR，類型F-300，130u/mg

酯酶 Sulfatase from Helix pomatia 9016-17-5 5KU 通用試劑

加醋銨 99% Formic ccid 瞇達(dá)
脂質(zhì)體2000250克

526-08-9磺胺本吡唑SULFApxenAZOLE

4-Butoxy-3-chloropxenylboronic acid 480438-55-9

3-*基硅氧基-1-... 3-Trimethylsiloxy-1-propyne,99% 5582-62-7 5G 通用試劑

β-奈乙酸shēng huà shì jì容量：RT100克
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf

HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE 慢性髓原白血病細(xì)胞，K-562細(xì)胞 P3X63Ag8.653細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 Human

CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)

人紅系白血病細(xì)胞;TF-1

CM-R024大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1 小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；NIH/3T3培養(yǎng)T-24(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP

EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HPAEpiC細(xì)胞，人肺泡上皮細(xì)胞 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,MES-13細(xì)胞 CL-0090Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HPMEC-c 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；NIH/3T3培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。