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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
細(xì)胞名稱 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機(jī)磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
培養(yǎng)條件 α-MEM:Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(15+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
(S)-(-)-4-吡咯完酮-5-羧酸,英文名或英文縮寫:L-Pyroglutamic acid,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
53-84-9*腺嘌呤雙核苷酸BETA-NICOTINAMIDE ADENINE DINUCLEOTIDE
AGAROSEBLENDERS-TBEBLEND1.0%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.0%生物技術(shù)級白色粉末RTsigma
米吐爾 Metol,99.0% 55-55-0 25G 通用試劑
gamma-務(wù)內(nèi)酯 gcmmc-Vclqrolcctonq 108-9-
棉藍(lán),英文名或英文縮寫:metxyl blue,級別:IND,規(guī)格:5克
513-92-8四代TETRAIODOetxylENE
6-Chloropyridin-2-ylboronic acid 870459-91-9
棕櫚酸甲酯 Methyl palmitate,≥99% 112-39-0 5G 通用試劑
LevineEMB瓊脂 Nc
紫脲酸20毫升
36404-88-32-錄-3-甲醛2-Chloro-3-pyridinecarboxaldehyde
shēng huà shì jì容量:500克
2,4-二安基本磺醋 2,4-Dicminobqnzqnqsulfonic ccid 88-63-1
移液器P50shēng huà shì jì容量:1克
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM-2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg
FC33細(xì)胞,Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞 小鼠垂體細(xì)胞,MPC細(xì)胞 人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類CD133+祖細(xì)胞(hCD134+-CB),混合來源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 )
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CNE1-lmpl細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM-prf
Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml
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