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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-09-07 11:48:01瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨期 |
貼壁生長(zhǎng) | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘;1:2傳代;3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 C3
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:16,20;D19S433:13,13;D21S11:30,31;D2S1338:18,19;D3S1358:15,15;D5S818:11,13;D6S1043:12,18;D7S820:9,11;D8S1179:13,14;FGA:21,21;Penta E:11,11;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
GPT Others Rat 大鼠 GPT1 / GPT 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0136L6(大鼠成肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人氣管平滑肌細(xì)胞裂解物HTSMCL
HPAC細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人支氣管上皮細(xì)胞,16HBE細(xì)胞 皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF
TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人海馬神經(jīng)元 Human
CM-R120大鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人羊膜上皮細(xì)胞(HAEpic)( 5×105 )
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795
SLAMF6 Others Mouse 小鼠 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HPMEC)( 5×105 )
CL-0341H22(小鼠肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy 大鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
新生霉素/支*5
Silicatebacteriamedium(withoutAgar)
醋酸鹽瓊脂 Acetate Agar 250 用于細(xì)菌醋酸鹽試驗(yàn)
溴甲酚紫葡萄糖肉湯250g/瓶用于低酸性罐頭食品無菌檢驗(yàn)incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖肉湯250g/瓶用于低酸性罐頭食品無菌檢驗(yàn)
SorbitolMaconkeyAgarBase
LactobacillusbrothMedium
3.5%Nacl三糖鐵 3.5% NaCl Triple Sugar Iron Agar 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)篩選
多聚蛋白胨 Polypeptone 250克 BR
錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂250g/瓶用于芽孢桿菌的培養(yǎng)incubationmedia錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂250g/瓶用于芽孢桿菌的培養(yǎng)
NutrientAgar(Agar20g)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片液體大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基250g用于藥品無菌檢測(cè)
YGC瓊脂 250(g) incubation media YGC瓊脂 250(g)
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 250g 供分離發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌
麥迪、*檢定培養(yǎng)基(普通輕質(zhì)斜面培養(yǎng)基)麥迪(白)霉素效價(jià)測(cè)定
FS培養(yǎng)基 250g 用于梭桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-580圖片現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
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