Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583品牌培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583品牌
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內(nèi)可長滿。　
傳代情況  C3
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測  陰性　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人肺泡上皮細(xì)胞裂解物HPAEpiCL

鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu 胰腺癌細(xì)胞，PANC-1細(xì)胞 3T3 clone A31細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1

IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse

CM-M019小鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人非色素睫狀上皮細(xì)胞 (HNPCEpiC)( 5×105 )

小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4 小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4

ACRV1 Others Human 人 SP-10 / ACRV1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 (HIBEC)( 5×105 )

CL-0059CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19 小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HCT-8/FU 人結(jié)腸癌*耐藥株

ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
沙門氏菌A-F群診斷血清于沙門氏菌的血清學(xué)試驗(yàn)

胰胨瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于魚類細(xì)菌病中病原菌的分離培養(yǎng)

大腸菌群顯色培養(yǎng)基 Coliform Chromogenic Medium 1000ml 用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸菌群大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色

腦心浸出液瓊脂(BHIA)250g/瓶用于細(xì)菌尤其是苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)incubationmedia腦心浸出液瓊脂(BHIA)250g/瓶用于細(xì)菌尤其是苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)

麥康凱瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)
RVSalmonellaEnrichmentMedium

3%氯堿性蛋白胨水(APW) 250(g) incubation media 3%氯堿性蛋白胨水(APW) 250(g)

肝素抗凝管 肝素抗凝管 5毫升

中國藍(lán)瓊脂250弱選擇性培養(yǎng)基，用于腸道致病菌的選擇性分離incubationmedia中國藍(lán)瓊脂250弱選擇性培養(yǎng)基，用于腸道致病菌的選擇性分離

布氏肉湯添加劑 2ml*5 每支加入225ml布氏肉湯中
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583品牌液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)28030250g用于培養(yǎng)需氧菌、微需氧菌和厭氧菌，還用于藥品生物制品的無菌試驗(yàn)，及食品中產(chǎn)氣莢膜羧菌的厭氧...

Supper Broth Top Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules incubation media Supper Broth Top Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules

熒光威克酵母 支/瓶

VancomycinSolution

哥倫比亞*9cm 10個(gè)/包 營養(yǎng)非常豐富，用于各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。