Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內(nèi)可長滿。　
傳代情況  C3
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測  陰性　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
NTRK1 Others Rat 大鼠 TrkA / NTRK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL

A2780/Taxol細(xì)胞，人卵巢癌*耐藥株 鼠腹水單核細(xì)胞瘤,J774A.1細(xì)胞 前列腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪 Human

CM-M090小鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人角膜上皮細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 )

小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3

RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC

人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-h)(1×106)

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

M1 小鼠白血病細(xì)胞

KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BrilliantGreenAgarw/Sulfadi

ISPMedium

改良BPLS瓊脂 BPLS Agar，Modified 250 用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))

Dey/Engley中和肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品樣品的制備和衛(wèi)生環(huán)境中細(xì)菌的培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmediaDey/Engley中和肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品樣品的制備和衛(wèi)生環(huán)境中細(xì)菌的培養(yǎng)，每升培養(yǎng)基中需添加0204

HektoenEntericAgar
鐵瓊脂250g用于產(chǎn)硫化氫細(xì)菌計(jì)數(shù)

26050-088 500ml incubation media 26050-088 500ml

聚多曲霉(薩氏曲霉) 質(zhì)控菌株，對苯唑西林敏感，藥敏試驗(yàn) 支/瓶

StuartTransportMedium

四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB) 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)液體沙氏培養(yǎng)基250g用于真菌和酵母菌增菌

SSDC培養(yǎng)基(ISO) SSDC Medium 用于小腸結(jié)腸耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)

平板計(jì)數(shù)瓊脂 PCA 250克 食品細(xì)菌總數(shù)測定和平板計(jì)數(shù)

煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))

葡萄球菌增菌肉湯 250g 用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性增菌
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。